114年:(醫檢)免疫病毒(1)

下列何種方法不適合偵測細胞凋亡?

ATUNEL assay
BPI-Annexin V staining
CCaspase assay
D3H-thymidine incorporation

詳細解析

本題觀念:

本題核心在於區分評估細胞凋亡(apoptosis)與評估細胞增殖(proliferation)的方法。細胞凋亡常見的生物化學指標包括:細胞膜磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine, PS)外翻、caspase 蛋白酶活化、染色質內端核酸酶切割導致的 DNA 片段化;適當的檢測方法會針對這些凋亡特徵;而 3H-thymidine incorporation 則是測量 S 期 DNA 合成速率,評估細胞增殖,並不反映凋亡過程。

選項分析

  • 選項 A:TUNEL assay

    • TUNEL(terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling)利用 TdT 在凋亡細胞因 endonuclease 活化所造成的雙股 DNA 斷裂端(3′-OH)上標記修飾的 dUTP,進而偵測 DNA 片段化,是偵測晚期凋亡的金標準之一(aatbio.com)。
  • 選項 B:PI-Annexin V 染色

    • Annexin V 在 Ca^2+ 存在下能與外翻至細胞外側的 PS 高親和力結合,標示早期凋亡細胞;Propidium

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