114年:(醫檢)檢驗(2)

關於 E. coli染色體DNA複製的敘述,下列何者最不適當?

ADNA helicase 負責解開複製叉( replication fork )前面的雙螺旋結構
BOkazaki fragments 主要是由 DNA polymerase I 複製
CDNA polymerase II 不參與染色體複製
D完成整個染色體複製的時間約 40分鐘

詳細解析

本題觀念:

本題考察大腸桿菌(E. coli)染色體 DNA 複製中各種酶的功能及複製週期時間,包括 DNA helicase、DNA polymerase I/II/III 在複製叉的位置與角色,以及整個染色體複製所需時間(C 期)。

選項分析

  • 選項A:DNA helicase 負責解開複製叉前面的雙螺旋結構
    DNA helicase(E. coli 中主要為 DnaB)能以 5′→3′ 方向沿單股 DNA 解旋,並在複製 fork 前端打開雙股 DNA,以供 DNA polymerase 填補新股。DNA 複製複合體中,DnaB 就是可過程性解旋的主要酶(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov),正確。

  • 選項B:Okazaki fragments 主要是由 DNA polymerase I 複製
    真實情況是,lagging strand 的 Okazaki fragments 初始由 DNA polymerase III 延伸 RNA 引子合成,DNA polymerase I 僅以其 5′→3′ 外切酶活性去除 RNA 引子並填補缺口,並非主要延伸片段(ncbi.nlm.nih.gov)。此選項說法嚴重錯誤。

  • 選項C:DNA polymerase II 不參與染色體複製
    E. coli 有五種 DNA polymerase,其中 Pol III 是主要複製酶,Pol I 參與引子移除並填補 gap;Pol II 突變株生長正常,主要角色似乎與 SOS 修復或校正有關,並非負責常規拷貝合成,故一般認為 Pol II 不參與常態染色體複製(ncbi.nlm.nih.gov)。此敘述在基本分子生物課程中被視為正確。

  • 選項D:完成整個染色體複製的時間約 40 分鐘
    在理想營養及溫度條件下,E. coli 進行一次全染色體複製(C 期)需要約 40 分鐘;D 期(複製結束至分裂)約 20 分鐘,整體複製與分裂周期可透過 overlapping replication 實現 20 分鐘分裂一代(mdpi.com)。此選項正確。

答案解析

最不適當的敘述為選項 B。Okazaki fragments 的延伸由 DNA polymerase III 進行;DNA polymerase I 的 5′→3′ 外切酶活性只是用來移除 RNA 引子並填補生成的缺口,而非合成主體片段。

核心知識點

  • DNA replication fork 構成:DnaB helicase(解旋)、primase(引子合成)、SSB(保護單股)、DNA polymerase III holoenzyme(主要複製酶)、β clamp/γ clamp loader(提高過程性)
  • Lagging strand 合成循環:primase 合成 RNA primer → Pol III 延伸 Okazaki fragment → Pol I 5′→3′ 外切酶移除 primer 並填補 gap → DNA ligase 連接
  • DNA polymerase 角色:
    • Pol III:主要 replicative polymerase
    • Pol I:primer removal 與 nick translation
    • Pol II:SOS repair 與校正備援,不參與常態複製
  • E. coli 染色體複製周期:C 期 ≈ 40 分鐘;D 期 ≈ 20 分鐘;快速生長期透過 multifork replication 使分裂時間可短於單輪複製所需

臨床重要性

此題目屬基礎分子生物學範疇,與臨床診斷關聯不大,但掌握 DNA 複製機制對理解抗菌藥物如 DNA 合成抑制劑(e.g., quinolones 作用於 DNA gyrase)有間接幫助。