組織固定液對核酸品質的影響，由影響最弱至最強排列為何？① 10% buffered neutral formalin ②paraformaldehyde ③Carnoy's fixative ④Bouin's fixative

本題觀念：

固定液依其化學成分可分為交聯性（aldehyde 系）與沈澱性（alcohol–acid 系）兩大類，交聯性固定液透過甲醛分子在蛋白質/核酸上形成甲烷橋（methylene bridge），使組織結構「固定」但也改變核酸化學結構；沈澱性固定液則以酒精、酸或有機溶劑使蛋白質變性沉澱，同時可造成核酸的酸水解（depurination）或脫水性斷裂。核酸品質評估常以 PCR 產物可擴增長度、DNA 完整度指標（DIN/RIN）、以及擴增成功率等指標衡量。

選項分析

• 選項① 10% Neutral Buffered Formalin
  • 4% formaldehyde 在中性緩衝條件下緩慢穿透並交聯蛋白質與核酸，對組織形態學保留佳，分子檢測的 PCR 成功率亦高達約 98% （與 20% formalin 比，10% NBF 的靶向定序成功率顯著較佳）(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。
  • 交聯後雖有核酸修飾、斷裂，但因緩衝 pH 接近生理，酸水解作用輕微，整體對核酸品質影響最弱。

• 選項② Paraformaldehyde
  • Paraformaldehyde（PFA）實為高聚甲醛，溶

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