114年:(醫檢)微生(2)

分枝桿菌細胞壁中主要因何成分,使 carbolfuchsin 不易被酸性酒精脫色?

Ateichoic acid
BN-acetylglucosamine
Clong-chain fatty acid
DN-acetylmuramic acid

詳細解析

本題觀念

此題核心在 acid-fast 染色(Ziehl–Neelsen 或 Kinyoun 法)原理。Mycobacteria 細胞壁含有大量獨特的長鏈脂肪酸(mycolic acids),使得 carbolfuchsin 一旦經熱輔助滲透至細胞內,即不易被後續的酸性酒精脫色劑沖脫。

選項分析

  • 選項A teichoic acid
    teichoic acids 為典型 Gram-positive 菌(如 Staphylococcus、Streptococcus)胞壁中嵌入於肽聚醣層的磷酸甘油聚合物,與 acid-fast 性無關,mycobacteria 主要以 mycolic acids 而非 teichoic acids 決定其耐酸性,故此選項錯誤。

  • 選項B N-acetylglucosamine
    N-acetylglucosamine(GlcNAc)為肽聚醣中兩種重複二糖之一(另一為 N-acetylmuramic acid),僅構成常見細菌的肽聚醣骨架,並非 acid-fast 染色抗脫色的決定因子,故排除。

  • 選項C long-chain fatty acid
    Mycobacteria 細胞壁最關鍵的特徵即為其外層含有長鏈 α-羥基 β-烷基脂肪酸(mycolic acids,碳鏈長達 60–90)形成蠟狀膜,賦予細胞耐酸、耐鹼、抗脫色能力,使 carbolfuchsin 經 acid-alcohol 脫色步驟後仍被保留,故此為正確答案 (www2.austincc.edu)。

  • 選項D N-acetylmuramic acid
    N-acetylmuramic acid(MurNAc)亦為肽聚醣二糖之一,連結多肽鏈增強胞壁強度,但無法解釋 acid-fast 染色中 carbolfuchsin 耐酸脫色特性,故非答案。

答案解析

Mycobacteria 外膜由肽聚醣→arabinogalactan→mycolic acids 大量層狀結構構成,其中 mycolic acids 為長鏈脂肪酸,形成類蠟質的防護層。Carbolfuchsin 為脂溶性染料,於加熱協助下穿透該蠟層進入細胞。後續以酸性酒精脫色時,因 mycolic acids 之高度疏水性與蠟質結構使染料難以逸出,因而顯示 acid-fast 特性 (呈紅色),此即選項 C long-chain fatty acid 所描述之成分功能 (www2.austincc.edu)。

核心知識點

  • Acid-fast 染色原理:carbolfuchsin(脂溶性)+熱 → 染入 mycobacterial 細胞。
  • Mycobacterial 細胞壁構造:
    1. Cytoplasmic membrane
    2. 厚肽聚醣層(含 GlcNAc、MurNAc)
    3. Arabinogalactan
    4. Mycolic acids(長鏈脂肪酸,核心)
  • Mycolic acids:α-羥基 β-烷基長鏈脂肪酸(C60–C90),決定耐酸脫色性、抗藥性、維持細胞壁防護功能。
  • 臨床染色技巧:Ziehl–Neelsen、Kinyoun、Auramine-rhodamine 等皆利用此特性。

臨床重要性

掌握 acid-fast 性質有助於辨識 Mycobacterium(例如 M. tuberculosis、M. leprae)及 Nocardia,為支氣管鏡、痰液、組織切片等臨床檢體快速初篩之關鍵,並影響傳染病防治與抗結核療程監測策略。