操作Staphylococcus spp.之bacitracin 與furazolidone 抗藥性測試（ disk diffusion method ）時，用於5％ blood agar 塗盤的菌液濁度為多少？

本題觀念：

Staphylococcus spp. 進行抗生素紙片擴散（disk diffusion）測試時，需使用標準化菌液濁度（McFarland標準）以確保抗藥性判讀的一致性。常見測試包括 bacitracin 與 furazolidone，用於區分不同菌種（Staphylococcus vs. Micrococcus，或群A鏈球菌 vs. 其他β-溶血鏈球菌）。

選項分析

• 選項A 0.5 McFarland standard
  標準菌液濁度，廣泛應用於紙片擴散法。Furazolidone 測試明文指出：將生菌懸浮於 peptone water 中，與 0.5 McFarland 濁度標準比對，再塗布於血液瓊脂、施以 100 μg furazolidone 紙片後分析抑菌圈大小(1library.net)。Bacitracin 差異化測試（Group A鏈球菌 vs. 其他鏈球菌或 Staphylococcus spp. vs. Micrococcus）同樣在血液瓊脂塗板，菌液調至 0.5 McFarland 再施片，結果可區分敏感與耐藥(tmcc.edu)。
  符合 CLSI（現改稱為 CA-SFM或 EUCAST）紙片擴散標準操作程序中，快速且可靠。

• 選項B 1.0 McFarland standard
  濁度約為 3×10^8 CFU/mL，菌液過於濃稠，會導致抑菌圈縮小或消失，影響敏感度與再現性，不符合常規擴散法建議。

• 選項C 1.5 McFarland standard
  濁度遠高於標準值（約 4–5×10^8 CFU/mL），不適用於一般抗藥性篩檢，會造成凝聚生長，抑菌圈不明顯。

• 選項D 2.0 McFarland standard
  更高濁度（約 6×10^8 CFU/mL），菌體過量，擴散測試無法準確呈現抑菌情形。

答案解析

紙片擴散法須使用標準化的菌液濁度以確保不同實驗間的可比較性。國際上普遍採納的 CLSI/CA-SFM/EuCAST 指引均建議採用 0.5 McFarland standard（約 1–2×10^8 CFU/mL）進行常見細菌（包括 Staphylococcus spp.）的抗生素敏感度檢測。題中針對 bacitracin 與 furazolidone 兩項鑑別測試，皆在 5% 血液瓊脂上進行，且都強調以 0.5 McFarland 進行懸浮液比對，故正確答案為 A。

核心知識點

• McFarland 濁度標準：0.5 McF（1–2×10^8 CFU/mL）為紙片擴散法常用接種濁度
• CLSI M02/CA-SFM/EuCAST disk diffusion 指引
• Bacitracin disk test：
  • 用途：區分 Group A β-溶血鏈球菌 vs. 其他β-溶血鏈球菌；區分 Staphylococcus spp. vs. Micrococcus
  • 執行：攪散菌落製成 0.5 McF 懸浮液 → 血液瓊脂塗板 → bacitracin 紙片（0.04 U） → 35°C、18–24 小時 → 觀察抑菌圈（>10 mm 為敏感）
• Furazolidone disk test：
  • 用途：快速區分 Staphylococcus spp.（S） vs. Micrococcus（R）
  • 執行：菌液調至 0.5 McF → 血液瓊脂塗板 → 100 μg furazolidone 紙片 → 35°C、18–24 小時 → 觀察抑菌圈
• 臨床常用抗藥性篩檢規範及細菌同定流程，須掌握培養基選擇、接種濃度、抑菌圈判讀標準

臨床重要性

嚴格執行標準化接種濃度（0.5 McFarland）能確保抗生素敏感試驗結果的可靠性與可比較性，進而正確指導臨床用藥，避免偽陽性或偽陰性結果影響治療決策。