有關蛋白質定量的方法，下列敘述何者最為適當？

本題觀念：

本題考察常用蛋白質定量方法的化學原理與適用範疇，包括Biuret、Lowry、Bradford及Bromocresol Green (BCG)法對蛋白質或特定蛋白（albumin）的結合機制與測定條件。

選項分析

• 選項A
  Biuret法是在鹼性條件下（pH約10–12），Cu^2+與蛋白質中的肽鍵形成紫色配位複合物，吸光於540–550 nm，濃度與肽鍵數量成正比。敘述中提及「酸性條件」與實際相反，故此選項錯誤。(chemistry.mlsascp.com)

• 選項B
  Bromocresol Green (BCG)法專一測定血清albumin。在酸性環境（pH約4.0–4.2），BCG染料與albumin結合，使試劑由黃色轉為綠色或藍綠色，量測波長約628–630 nm即可計算albumin濃度。此法因選擇性高且易自動化，為臨床albumin常用定量方法，敘述正確。(elabscience.com)

• 選項C
  Bradford法使用Coomassie Brilliant Blue G-250染料，在酸性環境下與蛋白質（主要与Arg、Lys、His等帶正電殘基及芳香族殘基）結合，呈現藍色（吸光峰約595 nm）變化；並非使用Folin–Ciocalteu試劑，選項誤將Lowry與Bradford混淆，故錯誤。(en.wikipedia.org)

• 選項D
  Lowry法係先在鹼性環境以Biuret反應生成Cu^+，再以Folin–Ciocalteu（phosphomolybdate/phosphotungstate）試劑與Cu^+及蛋白酚類側鏈（Tyr、Trp、Cys）反應，產生藍色（吸光在650–750 nm）；並非Coomassie染料結合，敘述錯誤。(gbiosciences.com)

答案解析

正確答案為選項B。BCG法專用於血清albumin定量，酸性pH (4.0–4.2) 下BCG與albumin結合產色，量測波長約628–630 nm。其他三法（Biuret、Lowry、Bradford）分別在鹼性下以Cu^2+肽鍵配位、Folin–Ciocalteu顯色或Coomassie G-250染料結合蛋白，並非針對albumin或使用BCG染料，故不符題意。

核心知識點

• Biuret法：強鹼性環境、Cu^2+與肽鍵配位→紫色（λ≈540–550 nm），測定總蛋白(chemistry.mlsascp.com)
• Lowry法：Biuret前驅 + Folin–Ciocalteu試劑 → 深藍色（λ≈650–750 nm），靈敏度高，受酚類殘基影響(gbiosciences.com)
• Bradford法：酸性環境、Coomassie Brilliant Blue G-250結合蛋白→藍色轉變（λ≈595 nm），快速簡易(en.wikipedia.org)
• BCG法：酸性環境、Bromocresol Green專一結合albumin→綠色變化（λ≈628–630 nm），臨床albumin定量首選(elabscience.com)

臨床重要性

Albumin為反映肝功能、營養及腎病患者腎病綜合症時的水腫程度關鍵指標。BCG法自動化程度高、速度快、專一度佳，為臨床生化常規檢驗首選方法。