以uricase法測定尿酸,下列敘述何者最不適當?
詳細解析
本題觀念:
重點在uricase (urate oxidase) 酵素法測定尿酸時的反應機制與可能的干擾因素,以及與傳統phosphotungstic acid(磷钨酸)化學法的特異性比較。
選項分析
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選項A
敘述「uricase法比phosphotungstic acid 化學法特異性低」。
事實上,uricase酵素法因利用高度純化的uricase專一性氧化尿酸,干擾最少,被國際公認為參考方法之一;相較之下,phosphotungstic acid化學法易受其他還原性物質(如ascorbate、其他purine代謝產物、藥物等)干擾,特異性較低。多篇跨實驗室評估指出,uricase法「exhibits the least interference」(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov);又臨床自動化系統採用uricase/peroxidase偶合法,即因其專一性高而取代磷钨酸法(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。因此A選項表述不正確,是錯誤選項。 -
選項B
敘述「會產生CO2分子與allantoin」。
uricase(EC 1.7.3.3)催化尿酸氧化,先形成中間物5-hydroxyisourate,最終水解脫羧生成allantoin並釋放CO₂及H₂O₂。
Uricase反應式:Uric acid + O₂ + H₂O → 5-hydroxyisourate + H₂O₂ → allantoin + CO₂ (creative-enzymes.com)。此敘述正確。 -
選項C
敘述「peroxidase 為偶合酵素來進行呈色反應」。
uricase產生的H₂O₂需經peroxidase催化與chromogen(如4-aminophenazone + phenol衍生物)偶合,產生可見色素以光度測定,為uricase/peroxidase偶合比色法之原理。多份文獻皆明載此機制(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。此項正確。 -
選項D
敘述「guanine會干擾反應造成正誤差」。
雖有報告指出某些purine類似物(如hypoxanthine、xanthine甚至guanine)在高濃度時,可與uricase或peroxidase競爭,影響測定結果,但實際作用多為競爭性抑制,導致低估(負誤差)較常見;若pH極端或極高guanine濃度,亦不太會造成假性增高。常見文献將「competition from alternate purine substrates」列為干擾來源,並多造成負誤差(vaia.com)。因此選項D將方向說成「正誤差」不當,但該選項干擾可能性及方向都有問題,屬不精確而誤導。
比較A與D兩項皆為不適當敘述,但A之錯誤程度最大(與方法本身專一性核心完全相反),為最不適當。
答案解析
uricase法因高度專一性氧化尿酸而具有極少干擾,已成為臨床上公認的參考測定法之一;相對地,phosphotungstic acid化學法因受多種還原性物質干擾,特異性較低。uricase催化尿酸轉變為allantoin並釋放CO₂與H₂O₂,後續藉peroxidase偶合chromogen產生可見染料以比色量測。guanine等purine衍生物在極高濃度下可能與uricase競爭抑制,但通常造成負誤差,不會使結果假性增高。選項A將uricase法特異性說為低於磷钨酸法,與事實完全相反,故為最不適當選項。
核心知識點
- Urate oxidase (uricase)反應機制:
Uric acid + O₂ + H₂O → 5-hydroxyisourate + H₂O₂ → allantoin + CO₂ (creative-enzymes.com) - Uricase/peroxidase偶合比色法原理:
H₂O₂ + chromogen (e.g., 4-aminophenazone + phenol) —(peroxidase)→ 可測色素 (pubmed.ncbi.nlm.nih.gov) - 酵素法vs化學法干擾比較:
酵素法具高專一性、低干擾 (參考法);磷钨酸法易受ascorbate、其他還原劑及藥物干擾(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov) - 干擾源:
可能競爭性干擾者:hypoxanthine、xanthine、guanine等purine衍生物,但多致負誤差(vaia.com)
臨床重要性
選擇高專一性的uricase酵素法可避免藥物、色素、脂血等常見干擾,提高尿酸監測準確度,對治療高尿酸血症、腫瘤溶解症候群等需精準血清尿酸值時尤其關鍵。