113年:(醫檢)檢驗(2)
下列何種方法最不適用於病毒定量檢測?
APCR-RFLP(restriction fragment length polymorphism)
Breal-time RT-qPCR(reverse transcription qPCR)
Creal-time PCR
Dtranscription-mediated amplification assay(TMA)
詳細解析
本題觀念:
探討分子生物技術在病毒量(viral load)定量檢測的適用性。關鍵在於辨識各技術是否具備「線性量化」的能力,即能否透過樣本中核酸 copy number 與螢光訊號(或其他測量信號)之間建立標準曲線,測出絕對或相對的病毒量。
選項分析
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選項A PCR-RFLP(restriction fragment length polymorphism)
PCR-RFLP 結合 PCR 與限制性酶切,透過片段長度多型性(fragment length polymorphism)分析基因變異或分型,主要用於分子分型、鑑定單核苷酸多型性(SNP)或基因 phase determination,屬於終點檢測(endpoint analysis),無法取得螢光增量曲線,也不具備標準曲線量化功能,因此不適用於病毒量定量(ncbi.nlm.nih.gov)。 -
選項B real-time RT-qPCR(reverse transcription qPCR)
先將 RNA 逆轉錄為 cDNA,再進行即時螢光 PCR,能同步放大並量測螢光強度,取得 Ct 值(threshold cycle
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