113年:(醫檢)生化(1)
執行蛋白質的等電點電泳(isoelectric focusing electrophoresis)時,電泳膠中形成 pH 梯度需使用下列何種材料?
A聚醯胺(polyacrylamide)
B兩性電解質載體(carrier ampholytes)
C硫酸十二酯化鈉(sodium dodecyl sulfate, SDS)
D洋菜瓊脂(agarose)
詳細解析
本題觀念:
等電點電泳(Isoelectric Focusing, IEF)是依據蛋白質在特定 pH 環境下其淨電荷為零(即 pI)時停止遷移的特性,將不同 pI 的蛋白質分離。IEF 之所以能形成穩定且線性的 pH 梯度,關鍵在於在電泳膠中加入多種不同 pI 的兩性電解質載體(carrier ampholytes),在電場作用下自行排列,各自在其等電點處形成緩衝區,進而在膠體中建立 pH 梯度,蛋白質最後聚焦在其 pI 所對應的那一點位置 (biocyclopedia.com)。
選項分析
- 選項A 聚醯胺(polyacrylamide)
聚醯胺是最常見的膠基質,用於 SDS-PAGE 與 IEF 膠體的製備,但本身不具緩衝或形成 pH 梯度的功能,僅作為凝膠網孔結構 ([biocyclopedia.com](https://biocyclopedia.com/index/plant_protocols/amino_acids_proteins/isoelectric_focusing.php?utm_source=opena
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