113年:(醫檢)免疫病毒(1)
以電泳分析病毒蛋白時,蛋白通常先經sodium dodecyl sulfate(SDS)與下列何種化學藥品處理後,破壞其二級結構,再進行電泳?
A2-mercaptoethanol
Bacetone
Cformaldehyde
Dchloroform
詳細解析
本題觀念:
探討 SDS-PAGE 中蛋白質線性化及帶電方式。SDS 透過破壞蛋白的二級與三級結構並均勻包覆負電荷,而還需搭配還原劑切斷二硫鍵(disulfide bonds),才能完全破壞蛋白的三維結構,達到依分子量分離的目的。
選項分析
-
選項A 2-mercaptoethanol
β-mercaptoethanol(β-ME)為常用還原劑,可切斷蛋白內、間鏈的二硫鍵,協同 SDS 破壞蛋白二級、三級構象,達到完全線性化。符合 SDS-PAGE 標準樣品緩衝液配方(openwetware.org)。 -
選項B acetone
Acetone 常用於蛋白質沉澱或組織脫水,不具破壞二硫鍵功能,與 SDS-PAGE 樣品製備無關,無法線性化蛋白。 -
選項C formaldehyde
Formaldehyde 用於蛋白質或細胞固定,可在蛋白間形成交聯(methylene bridges),反而加強構象穩定性,與破壞二級結構目的相反。 -
選項D chloroform
Chloroform 為有機溶劑,常用於脂質抽提或核酸分離,並不切斷二硫鍵或破壞蛋白二級結構,故不適用於 SDS-PAGE 樣
...(解析預覽)...