112年:(醫檢)檢驗(1)
使用基質輔助雷射脫附游離飛行時間質譜法(MALDI-TOF MS)分析蛋白質樣品,所測得的飛行時間(time-of-flight)最主要取決於裂解胜肽片段(peptide fragment)的何種特性?
A裂解位置
B質荷比
C三級結構
D分子量
詳細解析
本題觀念:
本題聚焦在MALDI-TOF MS(基質輔助雷射脫附游離飛行時間質譜法)的核心原理:以加速後的離子飛行時間來反推其質荷比(m/z),並據此進行肽段或蛋白質的質量分析與鑑定。
選項分析
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選項A 裂解位置
裂解位置指胰蛋白酶(trypsin)等蛋白酶切割肽鍵的位點,與肽段的序列有關,影響肽指紋圖譜中哪些片段被產生,但不直接決定離子在TOF管中的飛行速度,與飛行時間並無一對一關係,故此選項錯誤。 -
選項B 質荷比
TOF分析器在線性電場中,離子被加速後,其動能等於電場所作功:½ mv² = z·V;飛行時間 t 與質荷比 m/z 成正比,具體關係為 t ∝ √(m/z)【(pubs.acs.org)】【(annexpublishers.co)】。在MALDI源下大部分帶單正電(z=1),故飛行時間主要反映肽段的質量與電荷比值。 -
選項C 三級結構
肽段的三級結構在離子化
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