111年:(醫檢)檢驗(2)
關於聚合酶連鎖反應（ polymerase chain reaction, PCR ）的敘述，下列何者最不適當？
A根據目標基因的序列及預期的 PCR 產物長度，來設計適當的 primer 及反應時間與溫度
BPCR反應的第一步驟是 denaturation ，目的是要將雙股的 DNA 打開
Cannealing的溫度與 primer 的序列組成有關
D所使用之鎂離子濃度若太高，則 PCR 產量會大幅降低
詳細解析
本題觀念：
聚合酶連鎖反應（PCR）關鍵在於三個連續溫度循環（變性、退火、延伸）的最佳化，以及鹼基引子（primer）設計與反應組成（如Mg2+濃度）的調控，以確保擴增產物的特異性與產量。
選項分析
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選項A
根據目標基因序列及預期產物長度設計primer後，延伸時間依產物長度（約1 min/kb）調整；而退火溫度則根據primer Tm設定。此為標準PCR設計原則，正確無誤 (lifescience.net)。 -
選項B
PCR的第一步為denaturation（通常94–95°C），目的是將雙股DNA完全解鏈，為primer結合與聚合酶作用創造單股模板，此敘述正確 (lifescience.net)。 -
選項C
退火溫度（Ta）須根據primer序列組成（GC含量、長度）計算Tm，並一般設定為Tm下調約3–5°C，才能兼顧特異性與結合效率，此敘述正確 ([aatbio
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