111年:(醫檢)生化(2)
利用波長 280 nm 測定蛋白質,主要是依據蛋白質中那二種胺基酸的吸光性?
A麩胺酸( glutamate )、離胺酸( lysine )
B酪胺酸( tyrosine)、色胺酸( tryptophan )
C丙胺酸( alanine)、纈胺酸( valine )
D甘胺酸( glycine)、絲胺酸( serine )
詳細解析
本題觀念:
利用 280 nm 測定蛋白質濃度,核心在於蛋白質中具芳香環的胺基酸可於此波長高度吸光。依照 Beer–Lambert 定律,蛋白質整體的光吸收係數(extinction coefficient)主要由其序列中芳香胺基酸的種類與含量決定,因此以 280 nm 直接測量吸光度即可估算蛋白質濃度(implen.cn)。
選項分析
- 選項A(glutamate、lysine):兩者側鏈為帶電或極性基團,無芳香環結構,不在 280 nm 有顯著吸收,故不符此方法原理。
- 選項B(tyrosine、tryptophan):二者皆含芳香環,tryptophan 在 280 nm 吸收最強,tyrosine 次之,為蛋白質在此波長吸光的主要來源,符合題意(wise-answer.com)。
- 選項C(alanine、valine):側鏈為小型脂肪族基團,無芳香環,於 UV 280 nm 幾乎無吸光,故非本題正解。
- 選項D(glycine、serine):側
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