111年:(醫檢)免疫病毒(2)
將檢體接種細胞後,出現細胞病變,最常用下列何種方式來進行快速鑑定?
A中和試驗( neutralization test )
B補體結合試驗( complement fixation test )
C免疫螢光試驗( immunofluorescence assay )
D西方墨點法( Western blot assay )
詳細解析
本題觀念:
本題在探討病毒分離(virus isolation)後的快速鑑定技術。當臨床檢體接種於細胞培養中並出現細胞病變(CPE)時,為了在最短時間內明確鑑別引起病變的病毒種類,可運用多種免疫學或分子方法。其中,免疫螢光試驗(immunofluorescence assay, IFA)是最常用也最迅速的一種。
選項分析
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選項A 中和試驗(neutralization test)
原理為病毒與病人血清中的特異抗體結合,阻斷病毒感染細胞並抑制CPE,依據抗體滴度推測病毒型別。此法需先長時間繁殖病毒(通常需3–5天以上)並觀察CPE,有時甚至更久,因此並不符合「快速鑑定」的要求。 -
選項B 補體結合試驗(complement fixation test)
屬於間接測定患者血清中對特定病毒的抗體水準,以補體是否被抗原–抗體複合物耗竭來判定。此為血清學檢測,無法直接鑑定細胞培養中所生長的病毒,且操作需經過加熱滅活、孵育一夜等步驟,相對耗時且不具特異性。 -
選項C 免疫螢光試驗(immunofluorescence assay)
可分為直接或間接法,利用螢光標定的單株或多株抗體偵測細胞內的病毒抗原。shell vial culture結合IFA可在接種後12–24小時檢出病毒早期抗原,比傳統CPE觀察提早數天甚至一週以上([pubmed.
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