111年:(醫檢)檢驗(1)
RNA是分子檢測的重要檢體,關於臨床 RNA 樣本收集與保存的敘述,何者錯誤?
A操作人員應使用乾淨的口罩與手套,避免 RNA 水解酶的污染
B萃取出的 RNA檢體應溶於微鹼性的二次水
C萃取出的 RNA,應保存於- 70℃ 或更低的溫度
D如果無法立即處理臨床檢體,為維持 RNA 的穩定性,檢體可保存於 2-8℃
詳細解析
本題觀念:
本題聚焦於RNA樣本的前處理與保存,包括避免RNase污染、提取後RNA的緩衝溶解及儲存溫度,以及臨床樣本於提取前的短期保存。
選項分析
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選項A
RNA極易被RNAase水解,而RNase無處不在(皮膚、空氣、實驗器材表面)。操作時必須採無菌技術:勤換手套、使用RNase-free耗材,亦建議戴口罩以避免呼氣或飛沫將RNase帶入樣本中。佩戴防塵口罩與無粉手套是維持RNA潔淨度的基本措施,符合國際RNA工作流程建議。(rkretsch.github.io) -
選項B
純化後的RNA需使用RNase-free水(或TE緩衝液,10 mM Tris pH 7.5–8.0 + 0.1 mM EDTA)重懸。Tris緩衝可維持微鹼性(pH≈7.5–8),EDTA螯合Mg²⁺抑制核酸酶,RNase-free水則常呈微鹼。實驗室慣用TE或RNase-free水進行RNA溶解。([qiagen.com](https://www.qiagen.com/us/products/discovery-and-translational-research/lab
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