111年:(醫檢)檢驗(1)
下列何者最能增加序列特異性聚合酶連鎖反應( Sequence-specific primer-PCR )之 HLA 分型的鑑別度(Resolution)?
A增加引子( Primer )種類
B增加引子( Primer )濃度
C增加 DNA濃度
D增加探針( Probe)數目
詳細解析
本題觀念:
本題探討 Sequence-specific primer PCR(PCR-SSP)在 HLA 分型中的「解析度」(Resolution)來源。PCR-SSP 係利用多對「等位基因特異性引子」(allele-specific primers)進行多組放大反應,藉此從不同擴增結果判讀樣本所攜帶的 HLA 等位基因。解析度高低取決於所設計之引子組數量與特異性;組數越多、涵蓋等位基因差異的特異性引子越細微,則能區分的等位基因種類與精細度越高。
選項分析
- 選項A 增加引子(Primer)種類
PCR-SSP 解析度仰賴「引子組數」與「針對等位基因差異的特異性」。設計更多、且能覆蓋更多 HLA 等位基因的序列特異性引子組,即可將分型從低解析度(group-level)提升至高解析度(4位數 allele-level)。例如,針對 B27 4 位數分型即使用 35 條 SSP 引子,分配於 29 種混合試劑中,成功區分 29 種 B2701–B*2730 等位基因,達到高解析度分型效果(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov);同樣地,DR 低解析度分型採用 19 次 PCR 反應(即 19 組引子組)完成對 DR1
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