111年:(醫檢)檢驗(1)
特異性寡核苷酸試紙是常用於檢測 HLA 等位基因的分子檢驗法,下列敘述何者錯誤?
A此檢測方法不需進行聚合酶連鎖反應
B此檢驗法無法鑑別未知的 HLA 等位基因
C設計良好的探針組可有效提升此檢驗法的鑑別度
D只需少許的檢體量為此檢驗法的優點之一
詳細解析
本題觀念:
本題探討 HLA 等位基因之分子檢驗法──PCR‐SSO(polymerase chain reaction–sequence‐specific oligonucleotide probe)技術,包括其基本原理、對未知等位基因的鑑別能力、解析度及檢體需求量等。
選項分析
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選項A 「此檢測方法不需進行聚合酶連鎖反應」
PCR‐SSO 顧名思義即「PCR 之後再以特定寡核苷酸探針進行雜交」才能完成分型,探針只能與 PCR 放大出的目標序列雜交、顯色或螢光偵測後才判讀等位基因;若未先行 PCR 放大,無法得到足夠量的目標片段供探針結合,因此此敘述錯誤(pubmed.ncbi.nlm.nih.gov)。 -
選項B 「此檢驗法無法鑑別未知的 HLA 等位基因」
PCR‐SSO 需事先設計探針對應既有等位基因序列,若樣本含有探針陣列中未涵蓋的突變,雜交結果將顯示異常(偽陽性或偽陰性),無法直接鑑定出新等位基因序列,僅能提示需進一步以序列定序(SBT)等方法確認;因此,原敘述正確([science.gov](https://www.science.gov/topicpages/a/allele-specific%2Bo
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