114年:醫學一(2)

在錯誤配對修復( mismatch repair )過程中,大腸桿菌是利用何種機制來標記模板股 DNA,以作為 DNA修復辨識?

A將胸腺嘧啶( thymine)上的甲基移除
B在尿嘧啶( uracil)上進行甲基化,轉變成胸腺嘧啶( thymine)
C在腺嘌呤( adenine)上進行甲基化
D在胞嘧啶( cytosine )上進行甲基化

詳細解析

本題觀念:

本題考點為大腸桿菌(E. coli)的 DNA 錯配修復(Mismatch Repair, MMR)機制,特別是關於**股別辨識(Strand Discrimination)**的原理。

在 DNA 複製過程中,聚合酶偶爾會發生錯誤(如鹼基配對錯誤)。修復系統必須能區分哪一條是正確的「模板股(Parental strand)」,哪一條是含有錯誤的「新合成股(Daughter strand)」。在大腸桿菌中,這一區分機制依賴於 DNA 的甲基化(Methylation)狀態

選項分析

  • A. 將胸腺嘧啶(thymine)上的甲基移除錯誤。胸腺嘧啶(T)本身結構上就含有一個甲基(它是 5-methyluracil),這是正常的 DNA 鹼基結構,並非用於標記新舊股的修復信號。此外,錯配修復機制並不涉及移除 T 上的甲基。

  • B. 在尿嘧啶(uracil)上進行甲基化,轉變成胸腺嘧啶(thymine)錯誤。這描述的是胸腺嘧啶的生物合成過程(從 dUMP 轉變為 dTMP),或者是在修復含尿嘧啶的 DNA 時可能涉及的概念,但這與錯配修復系統如何「辨識模板股」無關。

  • C. 在腺嘌呤(adenine)上進行甲基化正確

    1. 機制:大腸桿菌擁有一種酵素稱為 Dam methylase(DNA adenine methylase)。
    2. 標記位點:它會辨識特定的 GATC 序列,並將其中的**腺嘌呤(Adenine)**的 N6 位置加上甲基(形成 6-methyladenine)。
    3. 半甲基化狀態:DNA 複製剛完成時,模板股已經被甲基化,但新合成股尚未被甲基化,這種狀態稱為半甲基化(Hemimethylated)
    4. 修復辨識:錯配修復蛋白(MutS, MutL, MutH)利用這個時間差,辨識出未被甲基化的那股即為新合成股(含有錯誤的那股),進而進行切除與修復。因此,腺嘌呤的甲基化是標記模板股的關鍵信號
  • D. 在胞嘧啶(cytosine)上進行甲基化錯誤。雖然大腸桿菌體內確實有另一種甲基化酶 Dcm methylase 會將胞嘧啶甲基化(形成 5-methylcytosine),但這主要與限制修飾系統(Restriction-Modification system)或基因調控有關,並不是錯配修復系統(MMR)用來區分新舊股的信號。

答案解析

大腸桿菌的錯配修復系統(Mismatch Repair System)依賴 Dam methylaseGATC 序列中的 Adenine(腺嘌呤) 進行甲基化來區分模板股與新合成股。MutH 蛋白會特異性地切斷未甲基化(新合成)的 DNA 股,從而保留甲基化的模板股作為正確訊息的來源。因此,正確答案為 (C) 在腺嘌呤(adenine)上進行甲基化

核心知識點

  1. 關鍵酵素:Dam methylase (DNA adenine methylase)。
  2. 辨識序列5'-GATC-3'
  3. 標記鹼基腺嘌呤 (Adenine, A)
  4. 區分原理:利用複製後的短暫**半甲基化(Hemimethylated)**狀態。模板股為甲基化(Methylated),新股為未甲基化(Unmethylated)。
  5. 相關蛋白
    • MutS:辨識錯配鹼基。
    • MutL:連接 MutS 與 MutH。
    • MutH:具內切酶活性,辨識半甲基化的 GATC 位點,切斷未甲基化的新股。
    • UvrD:解旋酶,協助移除錯誤片段。

參考資料

  1. Mechanisms in E. Coli and Human Mismatch Repair - Nobel Prize
  2. Methylation of GATC sites is required for precise timing between rounds of DNA replication in Escherichia coli - Journal of Bacteriology
  3. DNA Mismatch Repair - Wikipedia