112年:醫學二(2)
下列何者最不可能被用來測定細胞中某一特殊核糖核酸(RNA)的數量?
A核糖核酸免疫沉澱(RNA immunoprecipitation)
B核糖核酸深度定序(RNA deep sequencing)
C核糖核酸微陣列(RNA microarray)
D反轉錄-即時聚合酶連鎖反應(reverse transcription-real time polym erase chain reaction)
詳細解析
本題觀念:
本題的核心觀念在於區分**RNA 定量分析(RNA quantification)與RNA-蛋白質交互作用分析(RNA-protein interaction analysis)**的實驗技術。醫師國考中常測試考生對於分子生物學技術「應用目的」的理解,而非僅是技術細節。
選項分析
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A. 核糖核酸免疫沉澱(RNA immunoprecipitation, RIP):
- 原理:利用針對特定「RNA 結合蛋白(RBP)」的抗體,將該蛋白質及其結合的 RNA 複合物(RNP complex)一起沉澱下來。
- 用途:主要用於研究**「特定蛋白質與哪些 RNA 結合」(即 RNA-Protein 交互作用)。雖然 RIP 產物後續可用 qPCR 或定序來分析,但 RIP 本身是一個富集(enrichment)與篩選**的過程,其測得的是「與特定蛋白結合的那一部分 RNA」,而非細胞內該 RNA 的「總量」。若要測定細胞中某 RNA 的總數量,使用 RIP 會因為只抓到結合態而嚴重低估或產生偏差,因此是最不可能的選項。
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B. 核糖核酸深度定序(RNA deep sequencing / RNA-seq):
- 原理:將 RNA 反轉錄為 cDNA 文庫
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