115年:(醫檢)檢驗(1)
關於分子檢驗的檢體選擇、採集與萃取上須考量很多因素，下列何者不是必要因素？
A檢體種類
B抗凝劑與檢體的比例
C衛生福利部食品藥物管理署查驗登記的檢測試劑
D檢體運送及儲存環境
詳細解析
本題觀念：
本題考查分子檢驗（Molecular Diagnostics）在**檢驗前階段（Pre-analytical phase）**的品質管制關鍵因素。分子檢驗對於檢體的品質要求極高，因為核酸（DNA/RNA）的穩定性容易受環境影響，且後續的擴增反應（如 PCR）極易受到抑制物質干擾。因此，檢體的選擇、採集容器（抗凝劑）、運送保存條件皆是影響檢驗成敗的「必要技術因素」。
選項分析
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A. 檢體種類 (Specimen type)：是必要因素。
- 不同的檢體種類（如全血、血漿、血清、組織、尿液、痰液等）含有不同量的目標核酸與干擾物質。
- 檢體種類直接決定了後續核酸萃取的方法（Extraction method）與試劑的選擇。例如，從石蠟包埋組織（FFPE）萃取 DNA 與從新鮮全血萃取 DNA 的前處理步驟完全不同。
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B. 抗凝劑與檢體的比例 (Ratio of anticoagulant to specimen)：是必要因素。
- 抗凝劑種類：分子檢驗最常用 EDTA（紫頭管），因為 Heparin（綠頭管）是強效的 PCR 抑制劑，會導致偽陰性。
- 比例問題：抗凝劑與血液的比例必須適當。若血液量太少（比例失衡），過高濃度的 EDTA 會螯合過多的鎂離子（Mg2+），這也是 Taq polymerase 的輔因子，導致 PCR 反應被抑制；若血液量過多導致抗凝不足，產生的微凝塊（Microclots）會捕捉核酸或阻塞萃取管柱，影響萃取效率。
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C. 衛生福利部食品藥物管理署查驗登記的檢測試劑 (Testing reagents registered with the TFDA)：不是必要因素。
- 法規與實務區別：雖然使用經查驗登記的體外診斷試劑（IVD）是臨床檢驗的理想標準，但在現行台灣法規（如《特管辦法》及實驗室開發檢測 LDTs 相關規範）下，並非所有分子檢測都「必須」使用 TFDA 查驗登記的試劑組。
- LDTs (Laboratory Developed Tests)：許多新興或罕見疾病的分子檢測，實驗室可依循 LDTs 規範，自行建立檢測方法並進行確效（Validation）。這些檢測使用的試劑可能是 Research Use Only (RUO) 等級或實驗室自配試劑，只要實驗室通過認證且方法經過確效，即可合法執行臨床檢驗。
- 技術層面：此選項屬於「法規行政層面」，而非直接影響檢體採集與萃取物理化學性質的「技術因素」。
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D. 檢體運送及儲存環境 (Specimen transport and storage environment)：是必要因素。
- 核酸穩定性：特別是 RNA 極不穩定，容易被環境中的 RNase 降解。檢體採集後需嚴格控制溫度（如 4°C 或 -70°C）與運送時間。
- DNA 降解：長時間放置室溫或反覆凍融（Freeze-thaw cycles）會導致 DNA 斷裂，影響長片段 PCR 的擴增效率。
答案解析
正確答案為 (C)。
本題問的是「檢體選擇、採集與萃取」的考量因素，主要著重於技術與生物學層面的操作變因。 選項 A、B、D 直接影響檢體內核酸的完整性（Integrity）、產量（Yield）以及純度（Purity），若未妥善控制將直接導致檢驗失敗（如偽陰性）。 選項 C 則是關於試劑的法規註冊狀態。在台灣的《特管辦法》架構下，合格的實驗室可以使用「自行研發檢測（LDTs）」來執行臨床分子檢驗，這類檢測所使用的引子（Primers）、探針（Probes）或萃取試劑，並不需要每一個都具有 TFDA 的 IVD 查驗登記許可證（只要實驗室整體系統通過認證與確效）。因此，它不是執行該檢驗技術的絕對必要條件。
核心知識點
- 分子檢驗前分析變異（Pre-analytical Variables）：
- 抗凝劑選擇：首選 EDTA（紫頭管）或 ACD（黃頭管）；絕對避免 Heparin（抑制 PCR）。
- 檢體運送：RNA 檢體需低溫、儘速處理（避免 RNase）；DNA 相對穩定但仍需避免反覆凍融。
- 溶血（Hemolysis）：血紅素（Heme）是潛在的 PCR 抑制劑，嚴重溶血應拒收。
- LDTs (實驗室開發檢測)：指實驗室內部自行研發、驗證並使用的檢測方法，適用於尚無商業化 IVD 套組或 IVD 不敷使用的情況。依據台灣法規，需在通過認證的實驗室執行。
新政策/指引改變 (如題目為政策/指引題)
- 實驗室開發檢測 (LDTs) 納管：台灣自 2021 年起修正《特管辦法》，將 LDTs 正式納入管理。至 2024 年落日條款結束後，所有執行 LDTs 的實驗室（包括分子檢測）都必須通過衛福部核准或認證，才能執行未經查驗登記試劑的臨床檢測。這強化了實驗室品質管理（如 ISO 15189），確認了「即使試劑未經 TFDA 查驗登記，只要實驗室與方法通過 LDTs 認證即可執行」的法規邏輯。