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115年:(醫檢)微生(1)

尿液細菌培養，使用 0.001毫升接種環取樣，接種於 5％綿羊血 agar。隔夜培養後，發現單一形態之100顆菌落。一般情況下，則此尿液細菌培養之後續操作或處置為何？

A發布疑似污染菌之報告
B執行該菌落的鑑定和藥敏試驗
C發布泌尿生殖系統的正常菌群之報告
D重新採檢，再重做

詳細解析

本題觀念：

本題考查的核心觀念是尿液細菌培養的定量分析 (Quantitative Urine Culture) 及其後續的臨床判讀準則 (Interpretation Criteria)。

主要涉及兩個步驟：

  1. 菌落數換算 (Colony Count Calculation)：根據接種環的體積計算每毫升尿液中的菌落形成單位 (CFU/mL)。
  2. 臨床決策 (Clinical Decision Making)：依據計算出的細菌濃度與菌落型態（單一或混合），決定實驗室的後續處置（如：發報告、加做鑑定與藥敏、或判定為汙染）。

選項分析

  • 計算步驟：

    • 使用 0.001 mL (1 µL) 的接種環。
    • 觀察到 100 顆菌落。
    • 換算公式：菌落數 × 稀釋倍數 (1/接種量) = CFU/mL。
    • 計算：100×10.001=100×1000=100,000 CFU/mL(105 CFU/mL)100 \times \frac{1}{0.001} = 100 \times 1000 = 100,000 \text{ CFU/mL} (10^5 \text{ CFU/mL})。

  • 選項 A：發布疑似污染菌之報告

    • 錯誤。通常認定為「污染」的情況包括：
      1. 生長 3 種或 3 種以上 的細菌（Polymicrobial growth），且沒有單一優勢菌種。
      2. 細菌數量低（如 < 10310^3 或 10410^4 CFU/mL，視採檢方式而定）且為皮膚常在菌（如 Coagulase-negative Staphylococci，雖有例外）。
    • 本題為「單一形態」（Pure culture）且濃度達 10510^5 CFU/mL，這是典型的感染表現，而非汙染。

  • 選項 B：執行該菌落的鑑定和藥敏試驗

    • 正確。
    • 依據臨床微生物實驗室操作規範（如 CLSI 或 ASM 指引）：
      • 對於清潔中段尿（Clean-catch midstream urine），單一菌種生長且菌數 ≥105 CFU/mL\ge 10^5 \text{ CFU/mL} 被視為顯著菌尿症 (Significant Bacteriuria)，強烈提示尿路感染 (UTI)。
      • 實驗室標準作業程序 (SOP) 規定，對於具臨床意義的致病菌（Significant growth），必須進行菌種鑑定 (Identification) 與抗生素敏感性試驗 (AST)，以提供醫師治療依據。

  • 選項 C：發布泌尿生殖系統的正常菌群之報告

    • 錯誤。
    • 雖然尿道口存有正常菌群（如 Lactobacillus spp., Corynebacterium spp., CoNS 等），但通常數量較少或呈現混合生長。
    • 當單一菌種大量生長達 10510^5 CFU/mL 時，即使是某些伺機性致病菌，也應先視為感染源進行鑑定，而非直接當作正常菌群忽略，除非鑑定結果確認為非致病性共生菌且病人無症狀。但就題目「後續操作」而言，第一步必須是去鑑定它，而非直接發正常菌叢報告。

  • 選項 D：重新採檢，再重做

    • 錯誤。
    • 重新採檢通常適用於結果無法判讀時，例如：檢體汙染（長 3 種以上細菌）、運送延遲導致細菌過度增生、或培養結果與臨床症狀嚴重不符。
    • 本題結果非常明確（高濃度純培養），是高品質的陽性結果，無需重做。

答案解析

本題的關鍵在於正確計算細菌濃度並應用判讀標準。

  1. 定量計算：0.001 mL 接種環長出 100 顆菌落，代表原始尿液細菌濃度為 105 CFU/mL10^5 \text{ CFU/mL}。
  2. 判讀標準：在臨床微生物學中，尿液培養長出單一菌種且濃度 ≥105 CFU/mL\ge 10^5 \text{ CFU/mL}，是確診尿路感染（UTI）的黃金標準（Kass criteria）。
  3. 處置：面對顯著陽性結果，實驗室的標準流程是進行後續的鑑定 (ID) 以確認致病菌種類，並執行藥物敏感性試驗 (AST) 供臨床用藥參考。

故正確答案為 (B) 執行該菌落的鑑定和藥敏試驗。

核心知識點

  1. 尿液定量培養計算：
    • 0.001 mL 接種環 (1 µL)：菌落數 × 1000 = CFU/mL。
    • 0.01 mL 接種環 (10 µL)：菌落數 × 100 = CFU/mL。
  2. 尿路感染 (UTI) 判讀標準 (Kass Criteria 等指引)：
    • ≥105 CFU/mL\ge 10^5 \text{ CFU/mL}：確診感染（尤其是單一菌種、無症狀或中段尿）。
    • 103−104 CFU/mL10^3 - 10^4 \text{ CFU/mL}：在有症狀病人、導尿檢體或特定致病菌（如 S. saprophyticus）可能具臨床意義，需視情況做 ID/AST。
    • 混和生長 (≥3\ge 3 種)：通常判定為汙染 (Contamination)，建議重採。
  3. 常見尿路致病菌：Escherichia coli (最常見)、Klebsiella spp.、Proteus spp.、Enterococcus spp.、Staphylococcus saprophyticus (年輕女性)。

參考資料

  1. Urine Culture Procedure - ASM Clinical Microbiology Procedures Handbook
  2. Interpretation of Urine Cultures - Johns Hopkins Medicine
  3. Guidelines for the diagnosis of urinary tract infections - IDSA
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