115年:(醫檢)微生(1)
有關分枝桿菌的敘述,下列何者最適當?
A利用16S rRNA 基因序列,可用以鑑定分枝桿菌
B分枝桿菌為兼性厭氧菌
C分枝桿菌分類於革蘭氏陰性菌
D結核分枝桿菌生長速度約2小時分裂一次
詳細解析
本題觀念:
本題考查 分枝桿菌屬 (Mycobacterium) 的微生物特性,包括其基因鑑定方法、氧氣需求、革蘭氏染色分類地位以及生長速度。這也是醫事檢驗師在臨床微生物學中必須掌握的基礎知識,特別是結核分枝桿菌 (M. tuberculosis) 與非結核分枝桿菌 (NTM) 的區別。
選項分析
- A. 利用16S rRNA 基因序列,可用以鑑定分枝桿菌 (正確)
- 解析:16S rRNA 基因定序是目前細菌鑑定(包括分枝桿菌)的重要分子生物學工具。分枝桿菌屬內物種繁多,傳統生化試驗耗時且有時難以區分。16S rRNA 基因序列在分枝桿菌中具有高度保守區與變異區,分析其序列差異(特別是超變異區)可準確鑑定到種 (Species) 的層級,尤其對於生長緩慢或生化反應不典型的 非結核分枝桿菌 (NTM) 鑑定特別有價值。
- B. 分枝桿菌為兼性厭氧菌 (錯誤)
- 解析:分枝桿菌,特別是結核分枝桿菌 (M. tuberculosis),傳統上被歸類為 絕對好氧菌 (Obligate aerobe)。它們需要氧氣才能進行繁殖與生長,這也是為何肺結核病灶常位於肺尖(氧分壓較高處)的原因。雖然在潛伏感染期 (Latent TB) 它們可能適應低氧環境進入休眠狀態,但在一般的微生物分類敘述中,它不屬於兼性厭氧菌(Facultative anaerobe,如大腸桿菌,既可有氧呼吸也可無氧發酵)。
- C. 分枝桿菌分類於革蘭氏陰性菌 (錯誤)
- 解析:在細菌的系統發生學 (Phylogeny) 分類上,分枝桿菌屬於 革蘭氏陽性菌 (Gram-positive bacteria) 的分支(放線菌門 Actinobacteria,高 GC 含量)。雖然因為其細胞壁含有大量的 黴菌酸 (Mycolic acid) 與脂質,導致一般革蘭氏染色難以著色(或呈現不規則的弱陽性),必須使用 抗酸性染色 (Acid-fast stain) 來鑑定,但它們絕非革蘭氏陰性菌。它們具有厚實的肽聚醣層,缺乏革蘭氏陰性菌典型的外膜結構(LPS)。
- D. 結核分枝桿菌生長速度約2小時分裂一次 (錯誤)
- 解析:結核分枝桿菌是典型的 生長緩慢 (Slow growing) 細菌。其世代時間 (Generation time) 或倍增時間約為 15~20 小時(甚至可達 24 小時),而非 2 小時。相比之下,大腸桿菌約 20 分鐘分裂一次。即便是生長較快的「快速生長分枝桿菌」(如 M. fortuitum),其世代時間也通常需 2-4 小時以上,而結核分枝桿菌培養通常需 2-4 週甚至更久才能看到菌落。
答案解析
答案:A 選項 A 敘述正確且符合現行臨床檢驗技術標準。選項 B 錯誤,應為好氧菌;選項 C 錯誤,分類上屬革蘭氏陽性(抗酸性);選項 D 錯誤,生長速度極慢,約 15-20 小時分裂一次。
核心知識點
考生應重點複習以下 分枝桿菌 (Mycobacterium) 的關鍵特性:
- 染色特性:抗酸性染色 (Acid-fast stain) 陽性(紅色),因細胞壁富含脂質(黴菌酸 Mycolic acid)。雖不易被革蘭氏染色,但分類屬於 革蘭氏陽性菌 (High GC Gram-positive)。
- 氧氣需求:絕對好氧 (Obligate aerobe),此特性決定了其在肺部的感染部位偏好。
- 生長速度:
- 緩慢生長群 (Slow growers):如 M. tuberculosis、M. avium complex,世代時間約 12-24 小時,培養需 >7 天。
- 快速生長群 (Rapid growers):如 M. abscessus、M. fortuitum,培養 <7 天可見菌落。
- 鑑定方法:
- 傳統:生化試驗 (Niacin, Nitrate reduction 等)。
- 分子:16S rRNA 定序 (金標準之一)、PCR-RFLP (hsp65)、MALDI-TOF MS (需特殊萃取步驟)。
參考資料
- Rapid and Accurate Identification of Mycobacteria by Sequencing Hypervariable Regions of the 16S Ribosomal RNA Gene. American Journal of Clinical Pathology, 2002.
- Mycobacterium tuberculosis. Microbiology Class / Wikipedia / Microbe Canvas. (General characteristics: Obligate aerobe, Gram-positive phylogeny, Slow growth rate).
- Necessity of Quality-Controlled 16S rRNA Gene Sequence Databases: Identifying Nontuberculous Mycobacterium Species. NCBI PMC.