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115年:(醫檢)免疫病毒(1)

有關hemagglutination inhibition （HAI）的敘述，下列何者最適當？

A可用來定量檢體中 hemagglutinin 的量
B只能用天竺鼠的紅血球
C血清檢體不需要經過前處理即可進行檢測
D紅血球沉降聚集於 U型盤底中央表示陽性

詳細解析

本題觀念：

本題考查 血球凝集抑制試驗 (Hemagglutination Inhibition Test, HAI) 的原理、操作細節及結果判讀。 HAI 是一種血清學試驗，主要用於檢測病人血清中是否存在針對特定病毒（如流感病毒、德國麻疹病毒等）的抗體。其原理是：某些病毒（具血球凝集素 Hemagglutinin）能使紅血球發生凝集（Hemagglutination, HA）。若血清中存在專一性抗體，該抗體會與病毒的血球凝集素結合，從而「抑制」病毒對紅血球的凝集作用。

選項分析

  • A. 可用來定量檢體中 hemagglutinin 的量

    • 不適當。
    • 解析：定量檢體中 Hemagglutinin (病毒抗原) 的試驗稱為 血球凝集試驗 (Hemagglutination Assay, HA)。在 HA 試驗中，我們測定的是病毒的效價 (HA Titer)。
    • 而 HAI (血球凝集抑制試驗) 則是固定病毒的量 (通常使用 4 個 HA單位的病毒量)，去測定血清中 抗體 (Antibody) 的含量（效價）。雖然 HAI 也可以反過來用已知抗體鑑定未知病毒，但其最主要的臨床用途是定量「抗體」，而非定量 Hemagglutinin 本身。

  • B. 只能用天竺鼠的紅血球

    • 不適當。
    • 解析：不同的病毒對不同物種的紅血球有特異性的親和力。
      • 流感病毒 (Influenza)：常用天竺鼠 (Guinea pig)、火雞 (Turkey) 或雞 (Chicken) 的紅血球（人 O 型血球亦可，但較少用）。
      • 德國麻疹病毒 (Rubella)：傳統上使用剛孵化的雛雞 (Day-old chick)、鵝 (Goose) 或鴿子 (Pigeon) 的紅血球。
      • 麻疹病毒 (Measles)：常用猴子 (Monkey) 紅血球。
    • 因此，並非「只能」使用天竺鼠紅血球。

  • C. 血清檢體不需要經過前處理即可進行檢測

    • 不適當。
    • 解析：血清中常含有 非特異性抑制因子 (Non-specific inhibitors)（如黏蛋白、脂質）和 自然凝集素 (Natural agglutinins)，這些物質會干擾試驗結果，導致假陽性或假陰性。
    • 因此，血清 必須 經過前處理。常見的處理方法包括：
      • RDE (Receptor Destroying Enzyme) 或 Kaolin (高嶺土) 吸附：去除非特異性抑制因子。
      • 紅血球吸附 (RBC Adsorption)：去除血清中可能存在的自然凝集素（避免血清本身就讓紅血球凝集）。
      • 加熱去活化：去除補體等熱不穩定物質。

  • D. 紅血球沉降聚集於 U型盤底中央表示陽性

    • 最適當。
    • 解析：讓我們分析 HAI 的結果判讀：
      • 陽性結果 (Positive, 有抗體)：血清中的抗體與病毒結合，抑制 了病毒凝集紅血球的能力。紅血球未被凝集，因重力作用自然沉降至 U 型盤底部，形成一個緊密的 圓點 (Button/Dot)。
      • 陰性結果 (Negative, 無抗體)：血清中無抗體，病毒保持活性並使紅血球發生凝集。凝集的紅血球形成網狀結構，鋪滿孔底，呈現 擴散狀 (Shield/Lattice)。
    • 選項描述「紅血球沉降聚集於 U型盤底中央」（形成圓點），代表凝集現象被抑制，即測到了抗體，故判讀為 陽性。

答案解析

正確答案為 (D)。在 HAI 試驗中，若紅血球未發生凝集而沉澱於孔底形成圓點 (Button)，代表血清中的抗體成功抑制了病毒的凝集作用，判定為陽性 (Positive)。

核心知識點

考生應對比 HA 與 HAI 的差異：

  1. HA (Hemagglutination) 試驗：
    • 目的：測量病毒 (Antigen/Hemagglutinin) 的量。
    • 結果：凝集 (Shield/Lattice) = 陽性 (有病毒)；沉澱 (Button) = 陰性。
  2. HAI (Hemagglutination Inhibition) 試驗：
    • 目的：測量抗體 (Antibody) 的量。
    • 標準化：需使用 4 HA Units 的病毒量進行反應。
    • 前處理：血清需用 RDE、Kaolin 或紅血球吸附處理，去除非特異性抑制物。
    • 結果：沉澱 (Button) = 抑制成功 = 陽性 (有抗體)；凝集 (Shield/Lattice) = 抑制失敗 = 陰性 (無抗體)。
  3. 紅血球選擇：依病毒種類而異（流感-天竺鼠/雞；德國麻疹-鵝/鴿）。

參考資料

  1. Microbe Online - Hemagglutination Inhibition Test: Principle, Procedure, Uses
  2. Virology Online - Haemagglutination Inhibition Test
  3. CDC - Influenza Hemagglutination Inhibition Assay
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