114年:藥學二(第2次)
使用HPLC分析serine時,下列何種策略最不合適?
A使用酸性的移動相,搭配 C18管柱進行分析
B使用鹼性的移動相,搭配 HILIC(hydrophilic interaction chromatography )管柱進行分析
C使用酸性的移動相,搭配陽離子交換管柱進行分析
D使用鹼性的移動相,搭配陰離子交換管柱進行分析
詳細解析
本題觀念:
本題主要考查 胺基酸(Amino Acids)的理化性質 與 HPLC 層析分離機制 的搭配。
- 分析物性質:Serine (絲胺酸) 是一種極性(polar)、親水性(hydrophilic)的胺基酸。其側鏈為羥基 (-OH),等電點 (pI) 約為 5.68。
- 在酸性環境 (pH < pI) 下:帶正電 (Cation)。
- 在鹼性環境 (pH > pI) 下:帶負電 (Anion)。
- 層析管柱原理:
- C18 (逆相層析):利用疏水性作用力 (Hydrophobic interaction) 分離非極性化合物。
- HILIC (親水性交互作用層析):專門用於分離極性、親水性化合物。
- 離子交換 (Ion Exchange):利用電荷吸附原理,陽離子交換柱吸附正離子,陰離子交換柱吸附負離子。
選項分析
- A. 使用酸性的移動相,搭配 C18管柱進行分析 (最不合適)
- 分析:在酸性移動相中,Serine 的胺基被質子化 (),使分子帶正電且極性極高。C18 管柱的固定相是長鏈烷基,具有高度疏水性。
- 結果:極性的 Serine 與非極性
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