114年:藥學二(第2次)
固相萃取法的一般操作程序包括 conditioning 、eluting、sample loading 及washing等,下列何者為最後的操作步驟?
Aconditioning
Beluting
Csample loading
Dwashing
詳細解析
本題觀念:
本題考查的是固相萃取法 (Solid Phase Extraction, SPE) 的標準操作流程。SPE 是一種常用的樣品前處理技術,主要用於從複雜基質(如血液、尿液、環境水樣)中分離、純化及濃縮目標分析物。
一般最常見的 SPE 操作模式為「吸附-沖提 (Bind-and-Elute)」策略,其標準程序包含四個連續步驟:
- 活化/調節 (Conditioning)
- 上樣 (Sample Loading)
- 清洗 (Washing)
- 沖提 (Eluting)
選項分析:
- A. Conditioning (活化/調節):這是第一個步驟。
- 目的:使用適當的溶劑潤濕固相萃取管柱內的吸附劑(sorbent),活化其官能基,並創造與樣品溶劑相容的環境,確保樣品進入時能有效與吸附劑作用。
- C. Sample loading (上樣):這是第二個步驟。
- 目的:將液體樣品通過管柱。在此步驟中,目標分析物會因與吸附劑產生物理或化學作用而被保留(吸附)在管柱上,而部分無法被吸附的基質干擾物則會流出。
- D. Washing (清洗/淋洗):這是第三個步驟。
- 目的:使用適當強度的溶劑(沖提強度需弱於沖提溶劑,以免洗下分析物)去除吸附在管柱上的干擾雜質,同時保留目標分析物。
- B. Eluting (沖提/洗脫):這是最後一個步驟。
- 目的:使用對分析物親和力更強的溶劑(沖提劑),破壞分析物與吸附劑之間的作用力,將目標分析物從管柱上洗脫下來並收集,以進行後續的儀器分析。
答案解析
根據標準的固相萃取操作流程(Conditioning → Loading → Washing → Eluting),最後一個操作步驟為 Eluting (沖提)。
故正確答案為 (B) eluting。
核心知識點
考生應熟記固相萃取 (SPE) 的 「CLWE」 四步驟口訣及其原理:
- Conditioning (活化):潤濕吸附劑,建立溶劑環境。
- Loading (上樣):讓分析物吸附於固定相 (Retention)。
- Washing (清洗):去除干擾物 (Remove interferences),溶劑強度需慎選(能洗掉雜質但不能洗掉藥物)。
- Eluting (沖提):回收分析物 (Recover analyte),使用強溶劑將藥物洗出。