下列何者不是液相層析法連續重複注入檢品或標準品希望求得之資料？

本題觀念：

本題考查的是 高效液相層析法 (HPLC) 中的 系統適用性試驗 (System Suitability Test, SST) 以及 分析方法確效 (Method Validation) 的基本概念。特別是區分「儀器設定參數」與「由分析數據計算出的結果參數」。

在進行 HPLC 分析時，為了確保分析系統的精密度與適當性，常會進行「連續重複注入 (Continuous repeated injection)」檢品或標準品。這個動作主要是為了取得統計數據來評估系統的穩定性與再現性。

選項分析：

• A. 波長 (Wavelength)：

  • 錯誤 (即為本題答案)。波長是檢測器 (Detector) 的 設定參數 (Instrument Setting)，是在進行分析 之前 就必須設定好的條件 (例如設定 UV 檢測器在 254 nm)。
  • 分析人員不會透過「連續重複注入」來「求得」波長。波長的選擇通常是在方法開發階段透過全波長掃描 (Spectral Scan) 決定的，一旦決定後就是固定的輸入值，而非分析後的輸出結果。

• B. 回收率 (Recovery)：

  • 正確 (視為分析目的之一)。雖然「回收率」嚴格來說屬於準確度 (Accuracy) 的範疇，通常涉及添加回收試驗 (Spiking)，但在廣義的品管 (QC) 或方法確效情境下，連續注入標準品與樣品是用來計算 精密度 (Precision)，而精密度是確保回收率數據可信的基礎。
  • 此外，在例行分析中，連續注入「品管查核樣品 (QC Sample)」並計算其對應標準品的濃度比值 (即 QC 回收率)，是用來確認當次分析是否有效的關鍵步驟。因此，回收率是透過分析數據 計算得知 的結果。

• C. 曳尾因數 (Tailing factor, T)：

  • 正確。這是系統適用性 (SST) 的重要參數之一。透過重複注入，我們可以計算每一針的曳尾因數，以監測層析管柱是否發生老化、污染或不當的物理化學作用，確保波峰形狀對稱。

• D. 管柱效率 (Column efficiency)：

  • 正確。通常以 理論板數 (Number of theoretical plates, N) 表示。這也是 SST 的核心參數。透過分析波峰的寬度與滯留時間，計算管柱的效率，確保管柱的分離能力符合分析要求。

答案解析：

連續重複注入 的主要目的是為了驗證分析系統的效能 (Performance) 和穩定性。

1. 我們可以得到 滯留時間 與 波峰面積 的再現性 (計算 RSD)。
2. 我們可以計算每一針的 曳尾因數 (T) 與 理論板數 (N) (即管柱效率)，確保層析條件未改變。
3. 我們可以透過比較標準品與QC樣品的應答值來計算 回收率 (確認分析準確性)。

然而，波長 (A) 是操作者在分析前「設定」給儀器的條件，並非透過重複注入樣品後「求得」的數據。因此，波長不是重複注入所尋求的資料。

故本題答案為 (A)。

核心知識點：

考生應熟記 USP <621> Chromatography 中規範的 系統適用性試驗 (System Suitability Test, SST) 常用參數及其意義：

1. 精密度 (Precision) / 重複性 (Repeatability)：
   • 透過 連續重複注入 (通常 5 針或 6 針) 標準品，計算波峰面積或高度的相對標準差 (RSD)。
   • 規範：通常要求 RSD $\le$ 1.0% 或 2.0% (視要求而定)。
2. 解析度 (Resolution, $R_s$)：
   • 評估兩相鄰波峰的分離程度。$R_s > 1.5$ 通常代表完全分離。
3. 曳尾因數 (Tailing Factor, $T$)：
   • 評估波峰對稱性。$T$ 應接近 1，通常要求 $T \le 2.0$。
4. 理論板數 (Plate Number, $N$)：
   • 評估管柱效率。$N$ 越大，管柱效率越好，波峰越尖銳。
5. 容量因子 (Capacity Factor, $k'$ 或 $k$)：
   • 評估波峰滯留情形。

考試技巧提醒：區分「自變數 (設定條件)」與「應變數 (分析結果)」。波長、流速、移動相組成是設定條件；面積、高度、$T$、$N$、$R$、回收率是分析結果。

參考資料

1. USP General Chapter <621> Chromatography
2. 中華藥典 第九版 通則：層析法