112年:藥學二(第2次)
用陽離子交換層析法分析選項之胺基酸時,若將動相的 pH 值緩緩提升,則最後沖提出者為何?
Aglutamic acid( C₅H₉NO₄)
Bleucine( C₆H₁₃NO₂)
Cthreonine( C₄H₉NO₃)
Dlysine( C₆H₁₄N₂O₂)
詳細解析
本題觀念:
本題考點為陽離子交換層析法 (Cation Exchange Chromatography) 的原理及其對胺基酸的分離順序。
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層析原理:
- 固定相 (Stationary Phase):陽離子交換樹脂本身帶負電(例如含有磺酸基 或羧基 ),因此會吸附帶正電的陽離子(胺基酸)。
- 分離機制:胺基酸在酸性環境下通常帶正電,會被固定相吸附。
- 沖提方式 (Elution):題目敘述「將動相的 pH 值緩緩提升」。隨著 pH 值上升,胺基酸會逐漸去質子化 (deprotonated),其淨電荷由「正」轉「零」再轉「負」。
- 當 pH < pI 時,胺基酸帶淨正電(吸附)。
- 當 pH = pI 時,胺基酸呈電中性(吸附力最弱或脫附)。
- 當 pH > pI 時,胺基酸帶淨負電(與固定相排斥,沖提出來)。
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沖提順序:
- pI (等電點) 越低的胺基酸,在較低的 pH 值時就會失去正電變成負電,因此最先沖提出來。
- pI (等電點) 越高的胺基酸,需要較高的 pH 值才能中和其側鏈的正電,因此與固
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