109年:醫學一(2)
將重組 DNA進行基因定點突變( site-directed mutagenesis )之過程,不需要下列何者?
A反轉錄酶( reverse transcriptase )
BDNA聚合酶( DNA polymerase )
Cdeoxyribonucleoside triphosphate
D突變的引子( mutated primers )
詳細解析
本題觀念:
基因定點突變(Site-Directed Mutagenesis) 基因定點突變是一種分子生物學技術,用於在已知的 DNA 序列(通常是質體上的重組 DNA)中引入特定的核苷酸變化(如點突變、插入或缺失)。
最常用的方法是基於 PCR(聚合酶連鎖反應) 的技術(例如 QuikChange 方法)。其基本原理是利用包含目標突變序列的合成引子(Primers),配合DNA 聚合酶(DNA polymerase) 進行複製與擴增,生成帶有突變的新 DNA 股。
選項分析
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A. 反轉錄酶(Reverse transcriptase):不需要。
- 分析:反轉錄酶的功能是以 RNA 為模板合成 cDNA。題目明確指出操作對象是「重組 DNA」(Recombinant DNA),即以 DNA 為模板進行修飾。因此,過程中完全不涉及 RNA 轉錄為 DNA 的步驟,故不需要反轉錄酶。
- 例外補充:雖然有極少數特殊方法可能從 RNA 出發,但在標準的重組 DNA 定點突變實驗(如針對質體)中,此酵素無用武之地。
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B. DNA聚合酶(DNA polymerase):需要。
- 分析:這是進行突變反應的核心酵素。它
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