107年:醫學一(2)

下列有關聚合 酶鏈鎖反應( polymerase chain reaction; PCR )的敘述,何者錯誤?

A擴大的 DNA 片段(amplified DNA fragments )是可以被選殖的
B同一組引子( primers )通常可以同時擴增多個基因體中的位點
C被擴增 DNA 片段的範圍( DNA boundaries )是取決於一對引子在 DNA 模板的相對位置
D一根毛髮上的毛囊( hair follicle )所萃取出的 DNA 就足夠為PCR 的模板

詳細解析

本題觀念:

本題考查 聚合酶連鎖反應 (Polymerase Chain Reaction, PCR) 的基本原理,重點在於引子 (primers) 的設計原則、特異性 (specificity)、靈敏度 (sensitivity) 以及 PCR 產物的後續應用(如選殖)。

選項分析

  • A. 擴大的 DNA 片段(amplified DNA fragments )是可以被選殖的 (正確)

    • PCR 擴增出來的 DNA 片段完全可以用於選殖 (Cloning)。常見的方法包括:
      • TA Cloning:利用 Taq 聚合酶在產物 3' 端留下的額外 'A' 鹼基,直接連接到帶有 3'-T 突出端的載體 (Vector) 上。
      • 平末端選殖 (Blunt-end cloning):使用具校正功能 (proofreading) 的聚合酶產生平末端產物進行連接。
      • 限制酶切位點選殖:在引子 5' 端設計限制酶切位點,擴增後經酵素切割再進行連接。
    • 此敘述符合分子生物學常規操作。
  • B. 同一組引子( primers )通常可以同時擴增多個基因體中的位點 (錯誤)

    • **PCR 的核心目標通常是「特異性」

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