110年:(醫檢)檢驗(2)
純化 RNA後,經適當稀釋後測定 260 nm 與 280 nm 的吸光度,下列何種結果顯示此 RNA 的品質最好?
AOD260=0.30; OD280=0.23
BOD260=0.26; OD280=0.23
COD260=0.34; OD280=0.17
DOD260=0.28; OD280=0.17
詳細解析
本題觀念:
本題考查的核心觀念是核酸純度分析 (Nucleic Acid Purity Analysis),特別是利用光譜分析法 (Spectrophotometry) 測定 RNA 品質的判讀標準。
在分子生物學與臨床檢驗中,我們會測量核酸樣本在特定波長下的吸光值 (Optical Density, OD) 來評估其濃度與純度:
- OD 260 nm:核酸 (DNA/RNA) 的最大吸收波長。
- OD 280 nm:蛋白質 (特別是芳香族胺基酸) 的最大吸收波長。
- OD260/OD280 比值 (A260/A280 Ratio):用來評估核酸樣本中是否含有蛋白質污染的重要指標。
選項分析
判斷 RNA 純度的黃金標準是 OD260/OD280 比值約為 2.0。
- 若比值 < 1.8:通常代表有蛋白質、酚 (Phenol) 或其他有機溶劑的污染(因為這些物質在 280 nm 有較高吸收,导致分母變大,比值下降)。
- 若比值 > 2.1:可能代表 RNA 發生降解或有其他的化學污染。
我們計算各選項的比值:
- (A) OD260=0.30; OD280=0.23
- 計算:
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