110年:(醫檢)檢驗(2)
下列細菌分子分型法中，何者具較高重複性（ reproducibility ）與極高分辨度（ differentiation ）？
A增殖性片段長度多態現象分型法（ AFLP ）
B隨機複製多型性分析法（ RAPD ）
C聚合酶連鎖反應－限制酶片段長度多型性分析（ PCR-RFLP ）
D聚合酶反應結合單股結構多型性分析法（ PCR-SSCP ）
詳細解析
本題觀念：
本題考點為**細菌分子分型技術（Molecular Typing Methods）**的特性比較。主要評估考生對於不同分型方法在「重複性（Reproducibility）」與「分辨度（Differentiation/Discriminatory power）」上的優缺點認知。
選項分析
- A. 增殖性片段長度多態現象分型法（AFLP, Amplified Fragment Length Polymorphism）：
- 正確。AFLP 是一種結合了 RFLP（限制酶切割）與 PCR（聚合酶連鎖反應）技術的方法。
- 原理：利用限制酶切割全基因組 DNA，連接上轉接子（adaptors），再利用專一性引子進行高嚴謹度（high stringency）的 PCR 擴增。
- 特性：
- 高重複性：因為使用專一性引子與高黏合溫度（高嚴謹度 PCR），比起使用隨機引子的 RAPD，其實驗結果在不同實驗室間的再現性極佳。
- 極高分辨度：AFLP 可以同時掃描整個基因組中的多個多型性位點，產生複雜的指紋圖譜（通常有 50-100 條帶），因此鑑別力（Differentiation）非常高，能區分親緣關係極近的菌株。
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