110年:(醫檢)檢驗(2)
關於 TaqMan Real-Time PCR 檢測血漿中 B 型肝炎病毒的敘述,何者錯誤?
A特異性增幅 B型肝炎病毒 DNA
B所使用的 DNA聚合酶需可以剪切螢光染劑標定的探針
C螢光強度隨 PCR循環次數的增加而增加
D病毒濃度增加 10倍,則 Ct 值減少 5
詳細解析
本題觀念:
本題考查 TaqMan Real-Time PCR (即時聚合酶連鎖反應) 的原理,特別是應用於 B型肝炎病毒 (HBV) 定量檢測時的技術細節。核心觀念包括:
- TaqMan 探針機制:利用螢光共振能量轉移 (FRET) 及 DNA 聚合酶的 5' 外切酶活性。
- Ct 值與濃度的關係:Ct 值與起始模板濃度的對數成反比,這是定量 PCR 的數學基礎。
- HBV 病毒特性:HBV 為 DNA 病毒。
選項分析
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A. 特異性增幅 B型肝炎病毒 DNA:(正確)
- B型肝炎病毒 (HBV) 是一種 DNA 病毒 (具有部分雙股的環狀 DNA)。
- TaqMan 系統使用一對引質 (Primers) 和一條特異性探針 (Probe),能針對 HBV 的保守序列 (如 S gene 或 Core gene) 進行特異性擴增與偵測,是臨床上定量 HBV DNA (病毒載量) 的標準方法。
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B. 所使用的 DNA聚合酶需可以剪切螢光染劑標定的探針:(正確)
- 這正是 TaqMan 的運作原理。Taq DNA Polymerase 必須具有 **5' → 3' 外切酶活性 (5' exonuclease a
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