金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）接種至含有 toluidine blue O 之 DNase medium ， 35℃ 培養 24 小時，接種處周圍會呈現下列何種顏色？

本題觀念：

本題考查 DNase 試驗 (Deoxyribonuclease test) 的原理與判讀，特別是使用 Toluidine Blue O (TBO) 作為指示劑時的呈色反應。

1. 測試原理：DNase 培養基含有 DNA。若細菌能產生 DNase 酵素，會將培養基中的長鏈 DNA 水解切斷成短鏈的核苷酸 (nucleotides) 或寡核苷酸 (oligonucleotides)。
2. 指示劑 Toluidine Blue O (TBO)：
   • TBO 是一種變色性染料 (metachromatic dye)。
   • 未水解狀態 (陰性)：TBO 與完整的聚合 DNA (polymerized DNA) 結合時，結構穩定，呈現 藍色 (Blue)。
   • 水解狀態 (陽性)：當 DNA 被 DNase 分解後，TBO 與 DNA 的結合被破壞，轉而與游離的磷酸根或核苷酸結合，此時染料結構改變，呈現 粉紅色 (Pink/Rose-pink) 的變色反應 (Metachromasia)。

選項分析

• A. 藍色：錯誤。這原本是 TBO 與完整 DNA 結合時的背景顏色。若細菌不產生 DNase (陰性反應)，菌落周

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