110年:(醫檢)微生(2)
抹片經 Calcofluor white 染色後,觀察時所用的顯微鏡應為下列何者?
A光學顯微鏡
B螢光顯微鏡
C暗視野顯微鏡
D相位差顯微鏡
詳細解析
本題觀念:
本題的核心觀念在於Calcofluor white (CFW) 染色法的原理與應用。Calcofluor white 是一種非特異性的螢光染劑 (fluorochrome),它能與真菌細胞壁中的幾丁質 (chitin) 以及植物細胞壁中的纖維素 (cellulose) 緊密結合。當受到紫外線 (UV light) 或特定波長的藍光激發時,結合了染劑的結構會發出明亮的藍白色或蘋果綠色螢光。因此,觀察此染色結果必須使用特定的顯微鏡設備。
選項分析
- (A) 光學顯微鏡 (Optical/Bright-field microscope):
- 錯誤。一般光學顯微鏡(明視野顯微鏡)主要利用可見光穿透檢體,觀察的是樣本對光線的吸收或折射(如革蘭氏染色、劉氏染色)。Calcofluor white 是一種螢光染劑,必須經由特定波長的光源(如 UV)激發才能發光,一般光學顯微鏡的鎢絲燈或鹵素燈光源與濾片系統無法提供螢光觀察所需的激發光與阻斷濾片。
- (B) 螢光顯微鏡 (Fluorescence microscope):
- 正確。由於 Calcofluor white 是螢光物質,其原理是吸收短波長的光(激發光,Excitation)並釋放出長波長的螢光(Emiss
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