關於螢光顯微鏡之操作，以 fluorescein isothiocyanate （ FITC ）螢光劑觀察時，下列何者正確？

本題觀念：

本題考查螢光顯微鏡的基本操作原理，特別是針對常見螢光染劑 FITC (Fluorescein isothiocyanate) 的光學特性（激發光與散發光波長）以及濾鏡組（Filter set）的選擇。

核心概念包括：

1. 史托克位移 (Stokes Shift)：螢光物質吸收較短波長（高能量）的激發光，發射出較長波長（低能量）的螢光。
2. FITC 光譜特性：
   • 激發波長 (Excitation)：最大吸收峰約在 490-495 nm (藍光範圍)。
   • 發散波長 (Emission)：最大發射峰約在 517-525 nm (綠光範圍)。

選項分析

• A. 使用 495 nm激發光 (正確)

  • FITC 的激發光譜（Excitation spectrum）高峰位於 490~495 nm 附近。因此，使用波長約 495 nm 的藍色激發光是最有效率的，能使檢體產生最強的螢光。
  • 臨床顯微鏡配置的 FITC 濾鏡組（Filter cube），其激發濾片（Excitation filter）通常設計為通過 450-490 nm 的藍光。

• **B. 須選擇紫外激發濾鏡（ultraviolet excitati

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