以核酸增幅法檢測病原菌，下列何種方法需要使用 RNase H ？

本題觀念：

本題考查的是**核酸增幅技術（Nucleic Acid Amplification Techniques, NAATs）**中各類方法所需的關鍵酵素。特別是針對恆溫增幅法（Isothermal Amplification）與標準 PCR 的原理區分。了解不同增幅技術的反應機制與酵素組合是醫事檢驗師在分子診斷領域的核心能力。

選項分析

• A. Transcription-mediated amplification (TMA)：正確。
  • 原理：TMA 是一種恆溫（約 41-42°C）的 RNA 增幅技術（也可檢測 DNA）。它模仿反轉錄病毒的複製機制。
  • 所需酵素：主要使用 Reverse Transcriptase (RT, 反轉錄酶) 和 T7 RNA Polymerase (RNA 聚合酶)。
  • RNase H 的角色：TMA 反應中的反轉錄酶通常具有內源性的 RNase H 活性（或在類似技術 NASBA 中外加 RNase H）。當引物結合並合成第一條 cDNA 後，形成 RNA:DNA 雜合體（Hybrid）。此時必須依靠 RNase H 活性將雜合體中的 RNA 模板降解，讓引物能結合到 cDNA 上合成第二條 DNA 鏈，形成

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