110年:(醫檢)檢驗(1)

下列何種檢測檢體及保存方式的組合,可使 B 型肝炎病毒核酸萃取得到最佳的產量與品質?

A全血(不含抗凝劑)/室溫
B全血(含 EDTA)/ 2–8℃
C全血(不含抗凝劑)/ –70℃
D含EDTA全血之分離血漿/ –70℃

詳細解析

本題觀念:

本題考查的是**分子生物學檢驗(Molecular Diagnostics)中關於檢體採集、處理與保存(Specimen Collection, Handling, and Storage)**的標準作業程序,特別是針對 B 型肝炎病毒(HBV)的 DNA 核酸擴增檢測(NAT/PCR)。核心概念包括:抗凝劑的選擇、PCR 抑制物質的避免、以及核酸的穩定性保存。

選項分析

  • (A) 全血(不含抗凝劑)/室溫
    • 錯誤。不含抗凝劑的全血會凝固,雖然離心後可取得血清(Serum),但若將「全血」直接置於室溫下過久,細胞會代謝消耗葡萄糖並產生代謝廢物,且細胞可能破裂釋放核酸酶(DNase),導致病毒 DNA 降解。此外,室溫並非保存核酸的最佳溫度。
  • (B) 全血(含 EDTA)/ 2–8℃
    • 較差。雖然 EDTA 是適合 PCR 的抗凝劑(會螯合鎂離子,抑制 DNase 活性),且 2–8℃ 可短暫保存全血(通常限制在 24 小時內),但若未儘速分離血漿,紅血球隨時間可能發生溶血,釋放出的血紅素(Heme)是強效的 PCR 抑制劑(PCR inhibitor)。此外,全血中的白血球含有大量人體基因組 DNA,若發生細胞裂解,會干擾病毒核酸的萃取效率與純度。

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