110年:(醫檢)檢驗(1)
使用雙功能螢光探針引子( bi-functional fluorescent-probe primers )進行單純皰疹病毒第一及二型分型鑑定,此探針引子偵測核酸的原理與下列何者不同?
ASYBR Green
BFRET( fluorescence resonance energy transfer )
CTaqMan
D分子信標( molecular beacon )
詳細解析
本題觀念:
本題考查的是**即時聚合酶連鎖反應(Real-time PCR)中不同偵測技術的原理比較,特別是針對雙功能螢光探針引子(Bi-functional fluorescent-probe primers)**的機制理解。
雙功能螢光探針引子(最著名的例子是 Scorpion primers)是一種將「引子(Primer)」與「探針(Probe)」結合成單一分子的技術。其結構包含一個螢光基團(Fluorophore)和一個淬滅基團(Quencher),並形成髮夾結構(Hairpin loop)。
- 作用原理:當引子延伸後,探針部分會與新合成的互補序列結合,導致髮夾結構打開,螢光基團與淬滅基團分離,產生螢光訊號。
- 核心機制:此過程依賴**螢光共振能量轉移(FRET)**或接觸淬滅(Contact Quenching)的原理,即利用螢光基團與淬滅基團距離的改變來控制螢光訊號。
因此,本題的核心在於區分「專一性探針(Probe-based)」技術與「非專一性染劑(Dye-based)」技術。
選項分析
- A. SYBR Green:正確(原理不同)
- 原理:SYBR Green 是一種非專一性嵌入染劑(Intercalating dye)。它會嵌入到所有
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