以PCR-sequence specific oligonucleotide probe （ PCR-SSOP ）做 HLA 分型時，下列那個步驟非絕對需要？

本題觀念：

本題考查人類白血球抗原（HLA）分型技術中，PCR-SSOP（PCR-Sequence Specific Oligonucleotide Probe，序列特異性寡核苷酸探針） 的實驗原理與流程。

HLA 分型主要分為血清學法（已少用）與分子生物學法（現行主流）。分子生物學法中，最常見的兩種技術為：

1. PCR-SSP (Sequence Specific Primers)：利用「引物」的特異性來決定分型，需藉由電泳觀察有無擴增產物來判讀。
2. PCR-SSOP (Sequence Specific Oligonucleotide Probe)：利用「探針」的特異性來決定分型。先用通用引物擴增目標基因片段，再將產物與特異性探針進行雜合（Hybridization），最後透過呈色或螢光訊號偵測，不需要電泳分離DNA片段。

選項分析

• A. 抽取 DNA (DNA extraction)：
  • 絕對需要。所有分子生物學分型方法的第一步都是從檢體（如全血）中提取基因組 DNA (Genomic DNA) 作為模板。沒有 DNA 就無法進行後續的 PCR 反應。
• B. PCR擴增 (PCR amplification)：
  • 絕對需要。

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