114年:核醫診療(2)
放射免疫分析若為非競爭反應（ IRMA），反應過程中，非標幟抗原量越少，在反應後經加馬計數器測得的計數值通常會如何？
A越低
B越高
C相同
D無法計測
詳細解析
本題觀念：
本題探討放射免疫分析法（Radioimmunoassay, RIA）中的兩種主要反應型態：競爭型（Competitive RIA）與非競爭型（Immunoradiometric assay, IRMA）。 在核子醫學與臨床檢驗中，常利用放射性同位素（如 I-125）標幟抗原或抗體來定量檢體中的微量物質。
- 競爭型反應（RIA）：原理是檢體中的「未標幟抗原（待測物）」與試劑中的「標幟抗原」競爭有限的抗體結合位。待測物越多，標幟抗原結合得越少，因此最後測得的放射線計數值與待測物濃度成反比。
- 非競爭型反應（IRMA）：又稱為三明治法（Sandwich assay）或免疫放射分析。原理是使用「過量」的標幟抗體與固相抗體，去夾擊檢體中的「未標幟抗原（待測物）」。待測物越多，能形成的「固相抗體－待測抗原－標幟抗體」複合體就越多，因此最後測得的放射線計數值與待測物濃度成正比。
選項分析
- A. 越低：正確。在非競爭反應（IRMA）中，加入的放射性標幟抗體是過量的，只有在檢體中存在非標幟抗原（待測物）時，標幟抗體才會被結合並留在試管中（形成三明治結構）。當檢體中的非標幟抗原量越少，形成的複合體就越少，清洗掉未結合的標幟抗體後，使用加馬計數器測得的計數值自然會越低。
- B. 越高：錯誤。若計數值越高代表抗原越少，這是「競爭型放射免疫分析（RIA）」的特徵。在競爭型反應中，待測抗原量與計數值成反比關係。
- C. 相同：錯誤。計數值必然會隨著檢體中非標幟抗原的濃度變化而產生高低差異，否則將無法達到定量分析的目的。
- D. 無法計測：錯誤。只要抗原濃度落在該試劑組的偵測極限（Sensitivity）與線性範圍內，即可藉由加馬計數器測得具體數值。即使濃度極低，也只是測得接近背景輻射的低計數值，而非無法計測。
答案解析
非競爭型免疫分析（IRMA）的設計核心在於「過量的標幟抗體」。分析過程中，檢體內的「非標幟抗原（待測物）」會扮演橋樑的角色，將固相上的捕捉抗體與帶有放射性的偵測抗體連結起來。經過清洗步驟（Wash）去除未結合的游離標幟抗體後，留下來的放射活性全數來自於成功配對的三明治複合體。
因此，實驗最後所測得的加馬射線計數值（Count per minute, CPM）會與檢體中的抗原濃度呈現直接的正向線性關係（成正比）。當題目設定非標幟抗原量「越少」時，代表能留下來結合的標幟抗體也越少，最終的計數值當然也就是「越低」。
核心知識點
醫事放射師在準備放射免疫分析相關考題時，務必熟記以下兩種主要分析法的比較：
- 競爭型分析（RIA）：
- 標幟物：標幟「抗原」。
- 抗體量：限量。
- 計數值與待測物濃度關係：反比。
- 適用對象：通常用於小分子結構（如 T3、T4、類固醇荷爾蒙），因為小分子無法同時容納兩個抗體結合。
- 非競爭型分析（IRMA）：
- 標幟物：標幟「抗體」。
- 抗體量：過量。
- 計數值與待測物濃度關係：正比。
- 適用對象：通常用於大分子或具多個抗原決定位（Epitope）的蛋白質（如 TSH、腫瘤標記 CEA 等）。
臨床重要性
IRMA 方法因為使用了過量的抗體驅動反應，且不依賴競爭平衡，其靈敏度（Sensitivity）與精密度（Precision）通常遠高於傳統的競爭型 RIA。此外，IRMA 也大幅縮短了反應所需的培養時間，在現今的臨床檢驗與自動化分析技術演進中（例如進一步演變為酵素免疫分析 ELISA 或化學冷光免疫分析 CLIA）扮演了極為關鍵的基礎角色。