113年:核醫診療(2)

單株抗體的製備中,如何篩選專一性抗體?

A使用分子篩(molecular sieve)
B使用層析法(chromatography)
C使用離子交換法(ion exchange)
D使用免疫分析法,如酵素免疫分析法(ELISA)

詳細解析

本題觀念:

本題考查的是單株抗體(Monoclonal antibodies)的製備與篩選原理。單株抗體主要透過「融合瘤技術(Hybridoma technology)」來製備,這項技術由 Köhler 與 Milstein 發明。其核心步驟包含:將小鼠免疫以取得產生特定抗體的 B 細胞、將 B 細胞與具無限增生能力的骨髓瘤細胞(Myeloma cells)融合、利用 HAT 培養基篩選出成功融合的融合瘤細胞,最後必須從眾多融合瘤中「篩選」出真正能分泌我們所需之專一性抗體的細胞株,並進行次選殖(Subcloning)使其單株化。

在篩選專一性抗體這個步驟,最常利用抗原與抗體結合的專一性,透過高通量的免疫分析法來尋找目標細胞株。

選項分析

  • A. 使用分子篩(molecular sieve):錯誤。分子篩(或稱膠體過濾層析法,Gel filtration chromatography)是一種利用分子大小與形狀來分離物質的技術。在抗體工程中,它通常用於抗體量產後的「純化」與去鹽步驟,並無法用來檢驗或篩選抗體對特定抗原的專一性。
  • B. 使用層析法(chromatography):錯誤。層析法涵蓋範圍很廣(例如親和性層析法 Protein A/G chromatography),主要用途為將抗體從培養基液或腹水中「純化」與「濃縮」出

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