112年:核醫診療(2)

下列何種方法不適於純化抗體?

A蒸餾法
B膠體過濾法
C離子交換法
D親和層析法

詳細解析

本題觀念:

本題測驗考生對於「蛋白質(抗體)純化技術」的理解。抗體(Antibody)本質上是免疫球蛋白(Immunoglobulin),屬於大分子蛋白質。蛋白質的立體結構對溫度、酸鹼值及化學溶劑非常敏感,若處於極端環境下會發生不可逆的「變性(Denaturation)」,從而喪失其生物活性與抗原結合能力。因此,純化抗體必須採用溫和且能保持其結構完整性的分離技術,實驗室與工業界中最常使用的是各種「層析法(Chromatography)」。

選項分析

  • (A) 蒸餾法 (Distillation)不適用。蒸餾法是利用混合物中各成分「沸點」的不同,透過加熱使其汽化後再冷凝來分離物質。由於抗體是蛋白質,高溫加熱會破壞維持蛋白質二級、三級結構的氫鍵與疏水性交互作用,導致蛋白質發生不可逆的熱變性與凝固沉澱。因此,蒸餾法絕對不適合用來純化抗體。
  • (B) 膠體過濾法 (Gel filtration chromatography)適用。又稱為尺寸排阻層析法(Size-exclusion chromatography)。其原理是利用多孔性膠體顆粒作為固定相,依據蛋白質「分子大小(分子量)」的不同進行分離。較大的分子無法進入膠體孔隙,會最先隨流動相被沖洗出來;較小的分子則會進入孔隙,路徑較長、流出時間較晚。此法常被用來將分子量巨大的 IgM(

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