大腸桿菌 DNA 複製（DNA replication ）的DNA 聚合 酶無法用於聚合 酶鏈鎖反應（ polymerase chain reaction;PCR ）的主要原因為何？

本題觀念：

本題考查大腸桿菌（E. coli）DNA 聚合酶（DNA polymerase）無法用於聚合酶鏈鎖反應（polymerase chain reaction, PCR）的主要原因。PCR 反應需要在高溫（~95°C）進行 DNA 變性（denaturation），而 E. coli DNA 聚合酶在此溫度會不可逆失活。PCR 技術後來改用來自嗜熱菌（如 Thermus aquaticus）的 Taq DNA 聚合酶，因其具有優異的熱穩定性（thermal stability）。

選項分析

(A) 熱穩定性（thermal stability）差 ✅

• 正確答案。E. coli DNA 聚合酶（如 Pol I 的 Klenow fragment）最適反應溫度約 37°C，在 PCR 的高溫變性步驟（95°C）時會迅速失活（半衰期極短）。因此早期 PCR 每個循環都必須重新添加新鮮的 E. coli 聚合酶，既費時又昂貴，且效率極差。Taq 聚合酶在 95°C 半衰期超過 40 分鐘，能耐受多個 PCR 循環。

(B) DNA 模板（template）的選擇性差 ❌

• 錯誤。E. coli DNA 聚合酶能有效讀取各種單股 DNA 模板，模板選擇性並非其不適用 PCR 的主要問題。

(C) 不具有 3' 核酸外切酶（3

...（解析預覽）...