109年:(醫檢)檢驗(2)

下列何者不是使用非專一性引子進行 DNA 增殖反應?①隨機複製多型性分析法( RAPD ) ②增幅限制酶切位點( ACRS) ③增幅阻礙突變系統( ARMS )

A僅①②
B僅①③
C僅②③
D① ② ③

詳細解析

本題觀念:

各種 PCR 相關分子檢測方法的引子(primer)專一性。本題為反向題(問「不是使用非專一性引子」的方法),需判斷三種技術各自使用的引子類型:

  • RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA,隨機複製多型性分析法)
  • ACRS(Amplification Created Restriction Sites,增幅限制酶切位點)
  • ARMS(Amplification Refractory Mutation System,增幅阻礙突變系統)

選項分析

題目問「不是使用非專一性引子」→ 即問「使用專一性引子」的方法

① RAPD(隨機複製多型性分析法) RAPD 使用短的任意序列引子(arbitrary/random primers,約 10 個核苷酸),在低嚴格度(low stringency)條件下與基因組多處隨機互補位置結合,產生多型性條帶圖譜。引子序列是隨機設計的,非針對特定目標序列,屬於非專一性引子。 → 使用非專一性引子 ✅(所以「非答案」對象)

② ACRS(增幅限制酶切位點) ACRS 技術的引子設計是:故意在引子的 3' 端附近引入一個錯配鹼基(deliberate mismatch),使 PC

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