109年:(醫檢)生化(2)
使用 HPLC分析糖化血紅素( HbA₁c)時,儀器所含之固相為何?
AOctadecylsilane( C18 )
BCation exchange resin
CAnion exchange resin
DPolystyrene divinylbenzene
詳細解析
本題觀念:
HPLC 分析糖化血紅素(HbA1c)的固相(stationary phase)— 陽離子交換樹脂
高效液相層析法(high-performance liquid chromatography, HPLC)是目前測定 HbA1c 的金標準方法之一,也是 NGSP(National Glycohemoglobin Standardization Program)的參考方法。本題考查其固相(stationary phase)的種類。
選項分析
(A) Octadecylsilane(C18) 錯誤。C18 是逆相 HPLC(reverse-phase HPLC)的固相,根據分子疏水性(hydrophobicity)分離物質,用於分離脂質、藥物等非極性或弱極性分子,不適用於 HbA1c(血紅素蛋白)的分析。
(B) Cation exchange resin(陽離子交換樹脂) 正確。HbA1c 的 HPLC 分析使用陽離子交換層析(cation exchange chromatography)。HbA1c 與 HbA0 的等電點(isoelectric point)不同,在帶負電的陽離子交換樹脂上,不同血紅素變異體的正電荷分布有差異,因而以不同的鹽度梯度(gradient elution)被洗脫,達到分離與定量的目的。
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