109年:(醫檢)免疫病毒(2)

下列何種方法最主要用來分離淋巴球?

A密度梯度離心法( density gradient centrifugation )
B沈澱反應( precipitation )
C放射免疫分析法( radioimmunoassay )
D細胞毒殺試驗( cytotoxicity test )

詳細解析

本題觀念:

本題考查分離淋巴球(lymphocyte isolation)的主要實驗室方法。在免疫學實驗中,從全血中純化淋巴球是最基本且最常用的操作之一,密度梯度離心法(density gradient centrifugation)是目前臨床與研究實驗室的金標準方法。

選項分析

(A) 密度梯度離心法(density gradient centrifugation) ← 正確答案 這是分離淋巴球最主要的方法。利用 Ficoll-Paque(密度約 1.077 g/mL)作為梯度介質,離心後根據不同血液成分的密度差異進行分層:

  • 上層:血漿 + 血小板
  • 界面層(buffy coat):淋巴球 + 單核球(PBMC,密度 < 1.077 g/mL)
  • Ficoll 層
  • 底層沉澱:紅血球 + 嗜中性球(密度 > 1.077 g/mL)

收集界面層即可獲得周邊血液單核細胞(peripheral blood mononuclear cells, PBMCs),包含淋巴球(T 細胞、B 細胞、NK 細胞)及單核球。操作簡便、回收率高、細胞活性佳,是標準方法。

(B) 沉澱反應(precipitation) 沉澱反應是用於偵測或定量抗原-抗體反應的血清學技術(如瓊脂免疫擴散法、免疫電泳等),**不用於分離活細胞

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