109年:(醫檢)檢驗(1)
下列何種分子檢驗的方法是屬於訊號放大而不是目標物放大的方法?
A突變分辨聚合 酶連鎖反應( Mutagenically separated polymerase chain reaction, MS-PCR )
B應用核酸序列的放大反應( Nucleic acid sequence-based amplification, NASBA )
C轉錄介導的擴增法( Transcription-mediated amplification, TMA )
D雜交捕獲法( Hybrid capture assay )
詳細解析
本題觀念:
分子診斷的核酸擴增方法可分為兩大類:目標物放大(target amplification)和訊號放大(signal amplification)。本題(反向題)考核哪一個選項屬於訊號放大而非目標物放大。
選項分析
(A) 突變分辨聚合酶連鎖反應(MS-PCR, Mutagenically separated PCR) MS-PCR 是 PCR 的變體,利用設計的引子(primer)使不同等位基因(allele)在電泳中能分辨。PCR 系列方法均屬於目標物放大(直接複製 DNA 序列,增加目標分子數量)。✅ 屬於目標物放大(非本題答案)。
(B) 應用核酸序列的放大反應(NASBA, Nucleic acid sequence-based amplification) NASBA 是一種等溫(isothermal)轉錄型目標物放大技術,利用三種酵素(逆轉錄酶、RNase H、T7 RNA polymerase)以 RNA 為模板大量轉錄 RNA 複本,最終產物是 RNA。屬於目標物放大(增加目標 RNA 分子數量)。✅ 屬於目標物放大(非本題答案)。
(C) 轉錄介導的擴增法(TMA, Transcription-mediated amplification) TMA 原理與 NASBA 幾乎相
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