以雙縮 脲法（ Biuret method ）的測定原理與蛋白質的那一種性質有關？

本題觀念：

雙縮脲法（Biuret method）是臨床實驗室最常用的總蛋白（total protein）定量方法之一。其原理基於蛋白質的**胜肽鍵（peptide bond）**在鹼性環境下與二價銅離子（$\text{Cu}^{2+}$）形成有色絡合物，進行比色定量。

選項分析

(A) 胜肽鍵的吸光度 胜肽鍵本身在 UV 區（~210 nm）有吸光度，但雙縮脲法並非直接測量胜肽鍵的吸光度，而是透過胜肽鍵與銅離子反應後產生的有色絡合物來間接定量。此選項描述不夠準確。

(B) 芳香族支鏈的吸光度 此原理屬於 Lowry 法（Folin-Lowry method） 或**紫外光吸光法（280 nm）**的部分原理，後者利用酪胺酸（tyrosine）和色胺酸（tryptophan）等含芳香環的胺基酸在 280 nm 的吸收。與雙縮脲法無關。

(C) 胜肽鍵與鹼性銅離子複合物 ✅（正確答案） 雙縮脲法的核心原理：在強鹼性溶液（NaOH）中，蛋白質的胜肽鍵（—CO—NH—）上的氮原子與 $\text{Cu}^{2+}$ 形成紫色配位絡合物（coordination complex），每一個銅原子與 4 個來自胜肽鍵的氮原子配位。反應後溶液呈現紫色至紫紅色，在 540 nm 處（或 540–5

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