109年:(醫檢)生化(1)
關於蛋白質檢測的敘述,下列何者最準確?
A雙脲(Biuret )法是以銅鹽和硫酸反應,測出蛋白中的含氮量
B溴甲酚綠( BCG )在酸性溶液中與白蛋白結合,敏感性和特異性都高
CJaffe 氏法以 Picrate 結合蛋白而定量
DFearon 氏法以二乙醯基單 肟(Diacetylmonoxime )與蛋白加熱產生黃色物
詳細解析
本題觀念:
本題考查臨床化學中常見蛋白質定量方法的原理,包括 Biuret 法、溴甲酚綠(BCG)法、Jaffe 氏法及 Fearon 氏法。考生需正確掌握各方法的反應機制及其應用對象。
選項分析
(A) 雙脲(Biuret)法是以銅鹽和硫酸反應,測出蛋白中的含氮量 此選項錯誤。Biuret 法(雙脲法)的原理是:在鹼性(非硫酸/酸性)溶液中,銅離子()與蛋白質中的胜肽鍵(peptide bonds)形成紫藍色配位複合物,吸光峰在 540 nm。此方法偵測的是胜肽鍵的數量,反映蛋白質濃度,並非含氮量。含氮量定量法為 Kjeldahl 法。此外,Biuret 試劑成分為 NaOH 加硫酸銅(CuSO₄)加酒石酸鉀鈉(穩定 Cu²⁺),完全沒有硫酸參與呈色反應。
(B) 溴甲酚綠(BCG)在酸性溶液中與白蛋白結合,敏感性和特異性都高 此選項部分正確但有爭議——根據題目設計,為正確選項。BCG 是一種陰離子染料,在酸性 pH(約 4.2)條件下與白蛋白(albumin)結合形成藍綠色複合物,吸光峰約 630 nm,顏色深度與白蛋白濃度成正比。BCG 法靈敏度高,是臨床實驗室最廣泛使用的白蛋白定量法。然而值得注意的是:BCG 對白蛋白的特異性並非完美,已知會與 α-球蛋白(
...(解析預覽)...

升級 VIP 解鎖圖文解析