免疫螢光染色時，常使用下列何者作細胞的背景染色？

本題觀念：

免疫螢光染色（immunofluorescence staining）中，為了降低細胞的背景自發螢光（autofluorescence），提高信號對比度，需使用背景對比染料（counterstain）。Evans blue 是免疫螢光染色中最常用的背景染色試劑。

選項分析

(A) Evans blue — 正確答案。Evans blue 是一種偶氮染料（azo dye），在免疫螢光染色中作為背景對比染色劑（counterstain）使用。它能吸收組織的非特異性螢光（紅色螢光），使背景呈現深紅色，從而使特異性綠色螢光訊號（如 FITC）更為清晰易辨。最初在重症肌無力（myasthenia gravis）的肌肉抗體免疫螢光示範中被系統性採用，此後廣泛應用於細菌及組織的免疫螢光染色。

(B) fluorescein — 錯誤。Fluorescein（螢光素）本身是螢光染料，常以其衍生物 FITC（fluorescein isothiocyanate）與抗體結合，作為螢光標記物（fluorophore），而非背景對比染色劑；它本身即產生強烈綠色螢光，無法用於抑制背景。

(C) rhodamine — 錯誤。Rhodamine（玫瑰紅）同樣是螢光染料，產生紅/橘紅色螢光，常與抗體結合作為雙重免疫螢光的第二螢光標記。它本身發射螢

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